Product Description
ملخص
يُمكّن هذا التحليل الخلوي بتقنية HTRF من الكشف السريع والكمي عن بروتين PLK1 المُفسفر عند الثريونين 210. يُعدّ بروتين PLK1 (كيناز شبيه بولو 1) العضو الرئيسي في عائلة كينازات السيرين/ثريونين المحفوظة جيدًا، وهو ضروري لانقسام الخلية (الانقسام المتساوي). وبذلك، يُعتبر منظمًا رئيسيًا لنقطة التفتيش G2/M في دورة الخلية.
تنشيط PLK1 لتنظيم دورة الخلية: يتم تنشيط PLK1 عن طريق الفسفرة على Thr210 بواسطة كيناز AurA. يقوم PLK1 المنشط بفسفرة CDC25.
يُعدّ بروتين PLK1 بروتينًا أساسيًا مسؤولًا عن الانقسام الخلوي وتطور دورة الخلية/تكاثر الخلايا، مما يجعله هدفًا علاجيًا واعدًا لعلاج السرطان.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-PLK1 (Thr210)
يقيس اختبار HTRF Phospho-PLK1 (Thr210) بروتين PLK1 عند فسفرته عند الموقع Thr210. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-PLK1 (Thr210) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-PLK1 (Thr210)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين PLK1 الفوسفوري (Thr210) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفوسفو-PLK1 (Thr210) في لوحة واحدة
يمكن إجراء الكشف عن إجمالي PLK1 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل.
يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير الحجم مع الحفاظ على جودة عالية لتقنية HTRF. تطبيق - إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924