Product Description
ملخص
يُمكّن هذا التحليل الخلوي من الكشف عن الفوسفولامبان المُفسفر (PLN) عند السيرين 16. يُعدّ تحليل الفسفرة، إلى جانب تحليل الفوسفولامبان الكلي، مثاليًا لمراقبة تنشيط بروتين كيناز A (PKA) استجابةً لتحفيز مستقبلات البروتين المقترن بالبروتين ج (GPCR)، مثل مستقبلات بيتا 2 الأدرينالية. يقوم بروتين كيناز A (PKA) بفسفرة الفوسفولامبان عند بقايا السيرين 16.
في حالته غير المفسفرة، يثبط بروتين PLN مضخة الكالسيوم SERCA2a، وهي المضخة المسؤولة عن انقباض عضلة القلب. يؤدي فسفرة بروتين PLN، المحفزة بواسطة PKA وCaMKII، على الموقعين Ser16 وThr17 على التوالي، إلى إلغاء تثبيط SERCA2a. وتتحكم حالة فسفرة بروتين PLN في نشاط هذه المضخة في القلب.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-فوسفولامبان (Ser16)
يقيس اختبار فوسفو-فوسفولامبان (Ser16) مستوى الفوسفولامبان عند فسفرته عند الموقع Ser16. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-فوسفولامبان (Ser16) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفو-فوسفولامبان (Ser16) على لوحين
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن فوسفو-فوسفولامبان (Ser16) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفوسفو-فوسفولامبان (Thr17)1
يمكن الكشف عن الفوسفولامبان المُفسفر (Ser16) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي - أمراض القلب والأوعية الدموية
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924