مجموعة Revvity، 64RETTPEG، HTRF للكشف عن بروتين RET الكلي في الإنسان والفأر، 500 نقطة اختبار

ملخص
يقيس اختبار Total-RET الخلوي إجمالي بروتين RET (بأنواعه القصيرة والطويلة)، ويمكن استخدامه كاختبار معايرة مع مجموعة Phospho-RET (الشاملة). تتوافق هذه المجموعة مع المحاليل المنظمة المستخدمة في مجموعة Phospho-RET، لذا يمكن استخدام نفس المستخلص لتحليل كل من البروتينات المفسفرة والبروتينات الكلية.
الجين الأولي المسرطن RET (المعاد ترتيبه أثناء النقل الجيني)، المعروف أيضًا باسم c-Ret، هو مستقبل كيناز التيروزين، ويُعبَّر عنه بشكل أساسي في صورتين متماثلتين تتكونان من 1072 و1114 حمضًا أمينيًا. يؤدي تنشيط RET بواسطة روابط عائلة التغذية العصبية المشتقة من الخلايا الدبقية (GFL) إلى تكوين ثنائيات منه وفسفرته الذاتية على بقايا التيروزين داخل الخلايا. يُعد RET ضروريًا لنمو الجهاز العصبي والعديد من الأنسجة الأخرى. وقد تم الكشف عن تغيرات في RET في العديد من أنواع السرطان البشري. ولذلك، فإن تطوير مثبطات كيناز RET عالية الانتقائية والفعالية يُعد ذا أهمية بالغة لعلاج أنواع السرطان التي تحمل تغيرات في RET. ومؤخرًا، تم ربط RET أيضًا بالتنكس العصبي.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص Total-RET
يقيس اختبار HTRF Total-RET مستوى التعبير عن بروتين RET في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Total-RET جسمين مضادين موسومين: أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح، والآخر بفلوروفور مستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود بروتين RET في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذين المركبين إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.

بروتوكول فحص Total-RET ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف Total-RET HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.

بروتوكول فحص Total-RET أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن بروتين RET الكلي باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل