Product Description
ملخص
يُعدّ بوليميراز الحمض النووي الريبي II (RNA Pol II) أحد الإنزيمات الأساسية المسؤولة عن التعبير عن الجينات المشفرة للبروتينات وبعض جزيئات الحمض النووي الريبي النووي الصغيرة. يخضع النطاق الكربوكسيلي الطرفي (CTD) لـ RNA Pol II لدورة من الفسفرة، تُحفزها بشكل رئيسي أفراد عائلة الكيناز المعتمد على السيكلين (CDK). تسمح فسفرة CTD لـ RNA Pol II بربط عملية النسخ زمنيًا بالعمليات المرتبطة بها (تُحدد خصوصية ارتباط CTD بعوامل معينة من خلال أحداث الفسفرة/إزالة الفسفرة في مواقع محددة).
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفور-RNA بوليميراز II (Ser2)
يقيس اختبار Phospho-RNA Pol II (Ser2) مستوى RNA Pol II عند فسفرته عند الموقع Ser2. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم الاختبار جسمين مضادين، أحدهما موسوم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة الفسفورية على البروتين، بينما تم اختيار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تؤدي فسفرة البروتين إلى تكوين معقد مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين. هذا يُقرّب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، مما يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين دون الحاجة إلى غسل.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-RNA Pol II (Ser2)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن RNA Pol II (Ser2) HTRF. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-RNA Pol II (Ser2)
يمكن الكشف عن بوليميراز الحمض النووي الريبي II المفسفر (Ser2) باستخدام كواشف HTRF في صفيحة واحدة تُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يسمح هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) بتصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: قياس كمية البروتين
براند-HTRF
محلول منظم/محلول منظم لتحلل المذيب 1
طريقة الكشف - HTRF
الكائن المضيف: الإنسان والفأر
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
بوليميراز الحمض النووي الريبي الثاني المستهدف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: علم المناعة والأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924