مجموعة Revvity، 64SALL4TPEG، HTRF للكشف عن بروتين SALL4 البشري الكلي، 500 نقطة اختبار

ملخص
يُعدّ SALL4 عامل نسخ من عائلة جينات SALL (شبيهة بـ spalt)، المعروفة بنطاقاتها الزنكية ودورها المحوري في الحفاظ على قدرة الخلايا الجذعية الجنينية على التمايز الذاتي والتجدد. على الرغم من انخفاض تعبير SALL4 بشكل ملحوظ في معظم أنسجة البالغين، إلا أنه يُعاد تنشيطه بشكل غير طبيعي في أنواع مختلفة من السرطانات، مما يُحفز تكاثر الخلايا وظهور خصائص شبيهة بالخلايا الجذعية في الخلايا الخبيثة. يربط هذا التعبير المُعاد SALL4 بتكوّن الأورام وسوء التشخيص، مما يجعله مؤشرًا حيويًا هامًا وهدفًا علاجيًا محتملاً في علم الأورام.
أظهرت الأدوية المناعية المعدلة للإيميد (IMIDs)، بما في ذلك مشتقات ليناليدوميد وثاليدوميد، نتائج واعدة في استهداف جين SALL4، وخاصةً النظير SALL4A. وقد أثبتت هذه الأدوية فعاليتها المضادة للأورام، إلا أنها تشكل خطراً كبيراً نظراً لتأثيراتها المشوهة للأجنة، والتي قد تسبب تشوهات خلقية خطيرة. وعلى الرغم من هذا القيد، يبقى جين SALL4 هدفاً جذاباً في أنواع السرطان العدوانية التي يكون فيها التعبير عنه غير طبيعي، لا سيما عند فشل العلاجات الأخرى. ويهدف البحث الجاري إلى تطوير مثبطات أكثر انتقائية وأقل سمية، مع الموازنة بين الفوائد العلاجية لاستهداف جين SALL4 ومخاطر التشوهات الخلقية، مما يفتح آفاقاً جديدة في علاج السرطان.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص SALL4 الكلي
يقيس اختبار SALL4 الكلي مستوى التعبير عن بروتين SALL4 في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار SALL4 الكلي جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود بروتين SALL4 في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل.

بروتوكول فحص SALL4 الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين HTRF Total SALL4. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.

بروتوكول فحص SALL4 الكامل في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إجمالي بروتين SALL4 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يتيح هذا البروتوكول المصمم بتقنية HTS تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: قياس كمية البروتين
براند-HTRF
محلول منظم/محلول منظم لتحلل المذيب 4
طريقة الكشف - HTRF
النوع المضيف - الإنسان
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الهدف-SALL4
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: أورام الالتهاب
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل