Product Description
ملخص
تم تصميم هذا الفحص الخلوي لمراقبة فسفرة SHP2 على Tyr542، وهو ما يمثل علامة مميزة لتنشيطه.
تُفرط العديد من الخلايا السرطانية في التعبير عن روابط مثبطات نقاط التفتيش المناعية، مثل PD-L1. يرتبط PD-L1 بمستقبل مثبط نقطة التفتيش المناعية المقابل له، PD1، الموجود على سطح الخلايا اللمفاوية التائية. بدوره، يقوم مُركب PD1-PDL1 بتجنيد وتنشيط عوامل مثبطة فعالة، مثل SHP1 أو SHP2. يُحفز هذان الفوسفاتازان، اللذان يتم فسفرتهما على Tyr564 وTyr542 على التوالي بواسطة كيناز Lck، إزالة الفسفرة من بروتينات الإشارة، مثل ZAP-70 أو SLP-76، المشاركة في مسار تنشيط الخلايا التائية. في النهاية، يُشارك كل من SHP1 وSHP2 المُنشطان في تثبيط الخلايا التائية.
يُعتقد أن منع تنشيط SHP1 و/أو SHP2 بواسطة مثبطات الجزيئات الصغيرة يساهم في استعادة الاستجابة المناعية ضد الأورام.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-SHP2 (Tyr542)
يقيس اختبار Phospho-SHP2 (Tyr542) بروتين SHP2 عند فسفرته عند الموقع Tyr542. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-SHP2 (Tyr542) جسمين مضادين موسومين، أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-SHP2 (Tyr542)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين SHP2 الفوسفوري (Tyr542) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفوسفور-SHP2 (Tyr542) في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن بروتين SHP2 المُفسفر (Tyr542) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 2 محلول التحلل 3
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأمراض المعدية، الأورام، والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924