مجموعة الكشف عن SIRT1 من Revvity، 64SI1PEC، HTRF، 20000 نقطة تحليل

ملخص
ينتمي SIRT1 إلى الفئة الثالثة من عائلة بروتينات منظم المعلومات الصامت 2 (Sir2)، وهي إنزيمات نازعة أسيتيل الهيستون/البروتين (سيرتوينات). وقد وُصف استخدام مُعدِّلات SIRT1 كحل علاجي محتمل لعلاج العديد من الأمراض، بما في ذلك السرطان، والسكري، والشيخوخة، والأمراض التنكسية العصبية، والأمراض الأيضية، وأمراض القلب والأوعية الدموية. يُمكّن هذا الاختبار السريع والبسيط من التمييز بين المركبات متعددة الفينول، ويمكن استخدامه في الفحص عالي الإنتاجية لتحديد كلٍّ من مثبطات ومنشطات نشاط SIRT1.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:

تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
يستخدم اختبار HTRF SIRT1 جسمًا مضادًا أحادي النسيلة مُخصَّصًا لمجموعة الأسيتيل، مُوسَمًا بـ Eu-cryptate، وركيزة مُوسَمة بـ d2 مُؤَسْتَلة. تُحَصَّل أعلى إشارة في غياب SIRT1، وتنخفض هذه الإشارة تناسبًا مع عملية إزالة الأسيتيل. وبالتالي، ترتبط كمية الببتيدات المُزالة منها مجموعة الأسيتيل ارتباطًا مباشرًا بانطفاء الإشارة.

بروتوكول الفحص
يتكون التحليل من خطوتين: خطوة إنزيمية تليها خطوة كشف شاملة. يُحضن إنزيم SIRT1 أولًا في وجود أو غياب مركبات مع الركيزة المُؤَسْتَلَة المُوسَمة بـ d2. يُضاف NAD+ لبدء التفاعل. ثم يُضاف الجسم المضاد أحادي النسيلة المُوسَم بـ Eu-cryptate. يحتوي محلول الكشف على EDTA ومثبط SIRT (نيكوتيناميد) لإيقاف الكشف الإنزيمي. التطبيق: تحليل إنزيمي كيميائي حيوي
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 10 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الفئة المستهدفة - علم التخلق
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأيض/السكري، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 20000 نقطة تحليل