Product Description
ملخص
يتيح هذا الفحص القائم على الخلايا بتقنية HTRF الكشف السريع والكمي عن SMAD2 المفسفر عند سيرين 465/467، كمؤشر على نشاط إشارات TGF-ß.
تقوم مستقبلات TGF-ß بتنشيط SMAD2 بشكل مباشر عن طريق الفسفرة عند Ser465/467، مما يؤدي إلى انتقاله إلى النواة وتنظيم التعبير الجيني المتورط في موت الخلايا المبرمج والهجرة والتمايز، وكذلك في الاستجابات المناعية/الالتهابية وإعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلية.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-SMAD2 (Ser465/467)
يقيس اختبار فوسفو-SMAD2 (Ser465/4267) بروتين SMAD2 عند فسفرته عند الموقع Ser465/4267. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كلياً على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل.
يستخدم اختبار فوسفو-SMAD2 (Ser465/4267) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة الفسفورية على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر في العينة، وتُوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفو-SMAD2 (Ser465/467) على لوحين
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في طبق 96 بئراً قبل التحلل، ثم نقل المستخلصات إلى طبق كشف منخفض الحجم 384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن HTRF لـ Phospho-SMAD2 (Ser465/467).
يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وتماسكها.
بروتوكول فحص الفوسفو-SMAD2 (Ser465/467) على لوحين
يمكن الكشف عن SMAD2 المفسفر (Ser465/467) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل.
يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية التسلسل عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير الحجم مع الحفاظ على جودة عالية لتقنية HTRF. تطبيق - إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924