Product Description
ملخص
يتيح هذا الفحص القائم على الخلايا بتقنية HTRF الكشف السريع والكمي عن SMAD4 المفسفر عند الثريونين 277، كمؤشر على نشاط إشارات TGF-ß.
تقوم مستقبلات TGF-ß بتنشيط مركب SMAD2/3 بشكل مباشر عن طريق الفسفرة، مما يؤدي إلى ارتباطه بـ phospho SMAD4 الذي ينتقل بعد ذلك إلى النواة وينظم التعبير الجيني المشارك في موت الخلايا المبرمج والهجرة والتمايز، وكذلك في الاستجابات المناعية/الالتهابية وإعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلية.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص HTRF phospho SMAD4 Thr277
يقيس اختبار Phospho-SMAD4 (Thr277) بروتين SMAD4 عند فسفرته عند Thr277. وعلى عكس اختبار Western Blot، فإن هذا الاختبار يعتمد كلياً على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل.
يستخدم اختبار فوسفو-SMAD4 (Thr277) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة الفسفورية على البروتين، بينما تم اختيار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر في العينة، مما يُتيح تقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفو-SMAD4 (Thr277) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل التحلل، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض مكونة من 384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن HTRF لـ Phospho-SMAD4 (Thr277).
يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وتماسكها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-SMAD4 (Thr277)
يمكن الكشف عن SMAD4 المفسفر (Thr277) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحلل. لا حاجة لخطوات غسل.
يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية التسلسل عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير الحجم مع الحفاظ على جودة عالية لتقنية HTRF. تطبيق - إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924