مجموعة Revvity، 64TDPTPEH، HTRF للكشف عن بروتين TDP-43 الكلي في الإنسان والفأر، 10000 نقطة اختبار

ملخص
بروتين TDP-43، وهو بروتين رابط للحمض النووي، يشارك في استقلاب الحمض النووي الريبوزي (RNA). وقد تم تحديد تجمعات TDP-43 كسمة مميزة للتصلب الجانبي الضموري (ALS) والخرف الفصي الجبهي الصدغي (FTLD)، وعلى نطاق أوسع في العديد من الأمراض التنكسية العصبية: اعتلالات بروتين TDP-43. في الحالات المرضية (الطفرة أو خلل التنظيم)، يشكل TDP-43 أجسامًا تضمينية غير قابلة للذوبان في سيتوبلازم الخلايا العصبية في الدماغ والحبل الشوكي. يكشف اختبار TDP-43 Phospho-Ser409/410 عن بروتين TDP-43 البشري المفسفر في مستخلصات الخلايا.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص TDP-43 الكلي
يقيس اختبار HTRF Total TDP-43 مستوى التعبير عن بروتين TDP-43 في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Total TDP-43 جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بصبغة فلورية مانحة، والآخر بصبغة مستقبلة. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود بروتين TDP-43 في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.

بروتوكول فحص TDP-43 الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين TDP-43 الكلي بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.

بروتوكول فحص TDP-43 الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن بروتين TDP-43 الكلي باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل