Product Description
ملخص
يُعدّ عامل تنظيم الإنترفيرون 9 (IRF9) عامل نسخ يُشكّل مُركّب ISGF3 مع STAT1 وSTAT2 لتنظيم إشارات الإنترفيرون من النوع الأول. عند تنشيط مُستقبلات الإنترفيرون ألفا/بيتا، يقوم كلٌّ من JAK1 وTYK2 بفسفرة STAT1 وSTAT2، اللذين يرتبطان بدورهما بـ IRF9 لتكوين مُركّب ISGF3 النشط. ينتقل هذا المُركّب إلى النواة ويرتبط بعناصر الاستجابة المُحفّزة بالإنترفيرون (ISREs) لتحفيز التعبير عن الجينات المُحفّزة بالإنترفيرون (ISGs) المُشاركة في الدفاع المضاد للفيروسات، وتنشيط المناعة، وتنظيم دورة الخلية. يُعدّ IRF9 ضروريًا لإرساء حالة مضادة للفيروسات وتنسيق الاستجابات المناعية الفطرية. يرتبط خلل تنظيم IRF9 بأمراض المناعة الذاتية، واستمرار الفيروسات، وتهرّب السرطان من المناعة. يُبشّر التعديل العلاجي لنشاط IRF9 بتحسين المناعة المضادة للفيروسات والعلاج المناعي للسرطان.
يُعد اختبار AlphaLISA SureFire Ultra Mouse Total IRF9 اختبارًا مناعيًا ساندويتشيًا للكشف الكمي عن إجمالي IRF9 في مستخلصات الخلايا، باستخدام تقنية Alpha.
التنسيقات:
تحتوي مجموعة HV (عالية الحجم) على كواشف لتشغيل 100 بئر في تنسيق 96 بئر، باستخدام حجم تفاعل 60 ميكرولتر.
تحتوي مجموعة الـ 500 نقطة على ما يكفي من الكواشف لتشغيل 500 بئر في تنسيق 384 بئر، باستخدام حجم تفاعل 20 ميكرولتر.
تحتوي مجموعة النقاط العشرة آلاف على ما يكفي من الكواشف لتشغيل 10000 بئر بتنسيق 384 بئر، باستخدام حجم تفاعل 20 ميكرولتر.
تحتوي مجموعة النقاط الخمسين ألف على ما يكفي من الكواشف لتشغيل 50 ألف بئر في تنسيق 384 بئر، باستخدام حجم تفاعل 20 ميكرولتر.
تتوافق مجموعات AlphaLISA SureFire Ultra مع:
مستخلصات الخلايا والأنسجة
مُعدِّلات الأجسام المضادة
الأجسام المضادة العلاجية البيولوجية
يمكن استخدام مجموعات AlphaLISA SureFire Ultra للأغراض التالية:
فحوصات الكيناز الخلوي
دراسات تنشيط المستقبلات
الفحص عالي الإنتاجية للدراسات ما قبل السريرية
كيف يعمل؟
مبدأ اختبار Total-AlphaLISA SureFire Ultra
يقيس اختبار Total-AlphaLISA SureFire Ultra مستوى التعبير عن بروتين مستهدف في مستخلص خلوي.
يستخدم اختبار Total-AlphaLISA SureFire Ultra نوعين من الأجسام المضادة التي تتعرف على موقعين مختلفين على البروتين المستهدف. تتطلب اختبارات AlphaLISA نوعين من الخرز: خرز المستقبل وخرز المانح. يُغطى خرز المستقبل بعامل CaptSure™ الخاص لتثبيت الجسم المضاد الخاص بالاختبار، والموسوم بعلامة CaptSure. أما خرز المانح فيُغطى بالستربتافيدين لالتقاط أحد الأجسام المضادة للكشف، وهو مُرتبط بالبيوتين. في وجود البروتين المستهدف، يُقرّب الجسمان المضادان خرز المانح والمستقبل من بعضهما، حيث ينقل الأكسجين الأحادي الطاقة لإثارة خرز المستقبل، مما يسمح بتوليد إشارة ألفا مضيئة. تتناسب كمية الضوء المنبعث طرديًا مع كمية البروتين الموجودة في العينة.
بروتوكول فحص Total-AlphaLISA SureFire Ultra ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الصفيحتين زراعة الخلايا ومعالجتها في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة OptiPlate™ ذات 384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف Total-AlphaLISA SureFire Ultra. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها. إضافةً إلى ذلك، يمكن استخدام المستخلصات من بئر واحد لقياس أهداف متعددة.
بروتوكول فحص Total-AlphaLISA SureFire Ultra أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن البروتين المستهدف الكلي باستخدام كواشف AlphaLISA SureFire Ultra في صفيحة واحدة تُستخدم للزراعة والمعالجة والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يتيح هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة AlphaLISA SureFire Ultra.
تنوع التحليل
التعبير الكلي عن IRF9 في خطوط خلايا الفئران
زُرعت خطوط الخلايا الملتصقة في صفيحة ذات 96 بئرًا (40,000 خلية/بئر) وحُضنت طوال الليل عند درجة حرارة 37 درجة مئوية وتركيز 5% من ثاني أكسيد الكربون. ثم حُللت الخلايا باستخدام 100 ميكرولتر من محلول التحلل عند درجة حرارة الغرفة مع الرج (350 دورة في الدقيقة). وقُيمت مستويات IRF9 باستخدام اختبار AlphaLISA SureFire Ultra. في خطوة الكشف، نُقل 10 ميكرولتر من مستخلص الخلية (حوالي 4,000 خلية) إلى صفيحة OptiPlate بيضاء ذات 384 بئرًا، ثم أُضيف 5 ميكرولتر من مزيج المستقبل وحُضنت لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة. وأخيرًا، أُضيف 5 ميكرولتر من مزيج المانح إلى كل بئر وحُضنت لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة في الظلام. وقُرئت الصفيحة على جهاز Envision باستخدام إعدادات AlphaLISA القياسية. وكما هو متوقع، كان التعبير القاعدي الكلي لـ IRF9 منخفضًا في معظم خطوط خلايا الفئران التي تم اختبارها. تم الكشف عن مستويات عالية من التعبير في خلايا MEF ومستويات معتدلة من التعبير في خلايا RAW 264.7.
تطبيق - إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
العلامة التجارية: ألفا ليسا شورفاير ألترا
طريقة الكشف - ألفا
مدة البروتوكول: ساعتان في درجة حرارة الغرفة
حجم العينة - 10 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن في ثلج أزرق
الهدف-IRF9
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
النوع المستهدف - الفأر
تكنولوجيا ألفا
المجال العلاجي: الالتهابات، الأورام، علم الفيروسات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924