مجموعة Revvity، ASBF-TNFKB-A10K، AlphaLISA للكشف عن إجمالي NF-κB p65 البشري والفأري الخالي من البيوتين، 10000 نقطة اختبار

ملخص
يُعدّ NF-κB p65 (RelA) وحدة فرعية رئيسية في مُركّب عامل النسخ NF-κB، الذي يُنظّم الجينات المُشاركة في الالتهاب، والاستجابات المناعية، والاستماتة الخلوية، وتكاثر الخلايا. في حالته غير النشطة، يُحتجز p65 في السيتوبلازم بواسطة بروتينات IκB. عند تنشيطه بواسطة مُحفّزات التهابية مثل TNFα أو IL-1 أو الإشارات المرتبطة بمُسبّبات الأمراض، يُفسفر IκB ويتحلل، مما يسمح لـ NF-κB p65 بالانتقال إلى النواة وتحفيز نسخ الجينات المُستهدفة. يُساهم اضطراب نشاط NF-κB p65 في الالتهاب المُزمن، وأمراض المناعة الذاتية، والسرطان، لا سيما في تحفيز الالتهاب المُعزّز للأورام ومقاومة الاستماتة الخلوية.
مجموعة الكشف عن إجمالي NF-κB p65 البشري والفأري الخالية من البيوتين هي عبارة عن فحص مناعي ساندويتش للكشف الكمي عن إجمالي NF-κB p65 في المستخلصات الخلوية، باستخدام تقنية ألفا.
التنسيقات:

تحتوي مجموعة HV (عالية الحجم) على كواشف لتشغيل 100 بئر بتنسيق 96 بئر، باستخدام حجم تفاعل 60 ميكرولتر.
تحتوي مجموعة الـ 500 نقطة على ما يكفي من الكواشف لتشغيل 500 بئر في تنسيق 384 بئر، باستخدام حجم تفاعل 20 ميكرولتر.
تحتوي مجموعة النقاط العشرة آلاف على ما يكفي من الكواشف لتشغيل 10000 بئر بتنسيق 384 بئر، باستخدام حجم تفاعل 20 ميكرولتر.
تحتوي مجموعة النقاط الخمسين ألف على ما يكفي من الكواشف لتشغيل 50 ألف بئر في تنسيق 384 بئر، باستخدام حجم تفاعل 20 ميكرولتر.

تتوافق مجموعات AlphaLISA SureFire الخالية من البيوتين مع:

مستخلصات الخلايا والأنسجة
مُعدِّلات الأجسام المضادة
الأجسام المضادة العلاجية البيولوجية

يمكن استخدام مجموعات AlphaLISA SureFire الخالية من البيوتين من أجل:

فحوصات الكيناز الخلوي
دراسات تنشيط المستقبلات
الفحص عالي الإنتاجية للدراسات ما قبل السريرية
كيف يعمل؟
مبدأ اختبار Total-AlphaLISA SureFire Ultra الخالي من البيوتين
يقيس اختبار Total-AlphaLISA Surefire Ultra Biotin Free مستوى التعبير عن بروتين مستهدف في مستخلص خلوي.
يستخدم اختبار Total-AlphaLISA Surefire Ultra نوعين من الأجسام المضادة التي تتعرف على موقعين مختلفين على البروتين المستهدف. تتطلب اختبارات AlphaLISA نوعين من الخرز: خرز المستقبل وخرز المانح. يُغطى خرز المستقبل بعامل CaptSure™ الخاص لتثبيت الجسم المضاد الخاص بالاختبار، والموسوم بعلامة CaptSure. أما خرز المانح فيُغطى بعامل CaptSure 3 الخاص لالتقاط أحد الأجسام المضادة للكشف، والموسوم بعلامة CaptSure 3. في وجود البروتين المستهدف، يُقرّب الجسمان المضادان خرز المانح والمستقبل من بعضهما، حيث ينقل الأكسجين الأحادي الطاقة لإثارة خرز المستقبل، مما يسمح بتوليد إشارة ألفا مضيئة. تتناسب كمية الضوء المنبعث طرديًا مع كمية البروتين الموجودة في العينة.

بروتوكول فحص Total-AlphaLISA SureFire Ultra Biotin Free ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الصفيحتين زراعة الخلايا ومعالجتها في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة Optiplate™ ذات 384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف Total-AlphaLISA SureFire Ultra الخالية من البيوتين. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها. إضافةً إلى ذلك، يمكن استخدام المستخلصات من بئر واحد لقياس أهداف متعددة.

بروتوكول فحص Total-AlphaLISA SureFire Ultra أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن البروتين المستهدف الكلي باستخدام كواشف AlphaLISA SureFire Ultra الخالية من البيوتين في صفيحة واحدة تُستخدم للزراعة والمعالجة والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يتيح هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة AlphaLISA SureFire Ultra العالية.
تطبيق - إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
العلامة التجارية: AlphaLISA SureFire خالية من البيوتين
طريقة الكشف - ألفا
مجموعة المنتجات - طقم
مدة البروتوكول: ساعتان في درجة حرارة الغرفة
حجم العينة - 10 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن في ثلج أزرق
الهدف-NF-κB p65
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تكنولوجيا ألفا
المجال العلاجي: أورام الالتهاب
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل