شرائح المصفوفات الدقيقة ثلاثية الأبعاد من سارتوريوس، 2UNY2GW051021M1G، يونيسارت®

تُغطى شرائح المصفوفات الدقيقة من Unisart® بغشاء رقيق خاص من النيتروسليلوز لتلبية احتياجات التحليلات المتعددة عالية الدقة، مثل مصفوفات البروتين الأمامية أو مصفوفات البروتين العكسية. وهي متوفرة بأحجام مختلفة لوسادات النيتروسليلوز.

أهم ميزات المنتج:
ربط البروتين: وسادات غشاء نيتروسليلوز عالية الربط
الإشارة: نسبة إشارة إلى ضوضاء عالية (> 50) عند تركيزات بروتين منخفضة للغاية (< 0.5 نانوغرام)
الخلفية: خلفية أصلية منخفضة للغاية في التألق
التوافق: مع جميع أجهزة الكشف والمسح الضوئي
الأشكال: أشكال مختلفة من وسادات النيتروسليلوز لتناسب حجرات الحضانة
التحليلات: يُوصى بها للطورين الأمامي والعكسي. أصبحت مصفوفات البروتين (المصفوفات الدقيقة أو الرقائق الحيوية البروتينية) أداةً لا غنى عنها في العديد من تطبيقات علم البروتينات، بالإضافة إلى الاختبارات التشخيصية السريرية متعددة المعايير. يسمح تعدد بقع البروتين، المعروضة بنمط معقد على سطح الشريحة، بدراسة تفاعلات مختلفة في آنٍ واحد. لذلك، تُسهم مصفوفات البروتين، المستخدمة على سبيل المثال في فحص التفاعل المتبادل للأدوية أو الأجسام المضادة، أو في مسارات التعبير البروتيني في الخلايا السرطانية، في تسريع البحث عن أهداف دوائية جديدة وعلامات للأمراض بشكل ملحوظ.
أصبحت الأسطح الزجاجية المُعدّلة الركيزة الأكثر استخدامًا على نطاق واسع لمصفوفات الحمض النووي. مع ذلك، تختلف البروتينات اختلافًا كبيرًا عن الأحماض النووية؛ فهي غير متجانسة ومحدودة الاستقرار، بينما يتميز الحمض النووي بتجانسه واستقراره. تفقد البروتينات نشاطها بسهولة من خلال التمسخ والتجفيف، بينما يحتفظ الحمض النووي بنشاطه حتى بعد التمسخ. لا تُعدّ كيمياء البروتينات سهلة نظرًا لمحدودية طرق التضخيم، بينما تتوفر إنزيمات التقييد وتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) للحمض النووي. تُفسّر كل هذه الاختلافات حاجة البروتينات إلى ركيزة صلبة مختلفة للمصفوفات. يُعد غشاء النيتروسليلوز اليوم أفضل سطح وأكثرها شيوعًا لمصفوفات البروتينات.
بعد سنوات عديدة من التطوير، تم تصميم عملية تصنيع جديدة. تتيح هذه المعدات الروبوتية الجديدة والمُعتمدة تصنيع شرائح Unisart ثلاثية الأبعاد الجديدة بتناسق لا مثيل له.
تُحقق عملية الإنتاج الجديدة المزايا التالية:
مواصفات سُمك دقيقة للغاية مع حد أقصى للتفاوت يبلغ ± 1 ميكرومتر. يضمن السُمك الثابت بنية غشائية متجانسة، وبالتالي ارتباطًا بروتينيًا موحدًا وشكلًا متجانسًا للبقع.
دفعات أكبر وأكثر اتساقًا. تُمكّن العملية الجديدة من إنتاج شرائح مغلفة بالنيتروسليلوز بشكل مستمر، مما يضمن اتساقًا أفضل بين الدفعات وداخلها.
شريحة Unisart® ثلاثية الأبعاد عبارة عن شريحة زجاجية خاصة مغلفة بغشاء نيتروسليلوز دقيق المسام. وتتكون الوسادة الموجودة على الشريحة من غشاء نيتروسليلوز دقيق المسام ثلاثي الأبعاد، تم تحسينه بواسطة شركة Sartorius Stedim Biotech ليُظهر ألفة عالية للبروتين وقدرة ربط فائقة في جميع تطبيقات المصفوفات الدقيقة.
شريحة زجاجية: الشريحة المستخدمة في جهاز Unisart® مصنوعة من زجاج البوروسيليكات عالي الجودة، وقد خضعت لتحسينات إضافية لضمان التصاق مثالي لطبقة النيتروسليلوز. عند توفر المساحة الكافية، يمكن إضافة ملصق باركود مكون من 128 حرفًا على كل شريحة لتسهيل التعرف عليها وتتبعها بدقة. أبعاد الشريحة مطابقة للمعايير الصناعية لتتوافق مع الأجهزة المستخدمة حاليًا في مجال تحليل المصفوفات الدقيقة.
وسادة غشاء النيتروسليلوز: نظرًا لتقاربها الشديد مع البروتينات، تُستخدم أغشية النيتروسليلوز منذ عقود في العديد من التطبيقات، مثل التلطيخ المناعي والاختبارات المناعية للتدفق الجانبي. ولذلك، أصبحت أغشية النيتروسليلوز الركيزة المرجعية لربط البروتينات. تُمكّن الخصائص السطحية الفريدة لهذه الأغشية من ربط البروتينات فورًا من خلال التفاعلات الكهروستاتيكية والكارهة للماء. هذا الربط غير قابل للانعكاس في الظروف القياسية، ويُثبّت البروتينات في حالتها الوظيفية الطبيعية. ولأن البنية الميكروبورية ثلاثية الأبعاد توفر مساحة سطح داخلية كبيرة، يُمكن تثبيت كمية أكبر بكثير من البروتينات مقارنةً بالأسطح ثنائية الأبعاد القياسية، مثل الزجاج. وقد تم تحسين غشاء النيتروسليلوز ثلاثي الأبعاد الذي يُغطي شرائح Unisart لإظهار ما يلي:
زيادة نسبة الإشارة إلى الضوضاء، حتى عند تركيزات البروتين المنخفضة جدًا
خلفية منخفضة للغاية لشريحة المصفوفة الأصلية
مورفولوجيا بقعة مثالية
طلب :
تم تصميم شريحة Unisart® ثلاثية الأبعاد لتكون أفضل ركيزة لتطبيقات مصفوفة البروتين مثل:
مصفوفة البروتين الأمامية (المباشرة)
مصفوفة البروتين ذات الطور العكسي
مصفوفة البروتين الأمامية: تُعرف مصفوفة البروتين الأمامية، أو مصفوفات الالتقاط، بأنها شرائح تحتوي على كميات ضئيلة (في نطاق البيكولتر) من بروتينات نقية معروفة، مرتبة على شكل مصفوفة. يمكن طباعة أكثر من 15000 بقعة نشطة. بعد تعريضها لعينة محددة، يحدث تفاعل متزامن بين مختلف مكونات العينة وجميع الجزيئات الفردية المرصودة. تُستخدم الأجسام المضادة النوعية عادةً كجزيئات التقاط، ولكن يمكن أيضًا وضع المستضدات مباشرةً للكشف عن الأجسام المضادة الذاتية في المصل، على سبيل المثال. قد تعمل الببتيدات، والأبتاميرات، والأحماض النووية، والإنزيمات كجزيئات التقاط بديلة. وبذلك، يمكن دراسة مجموعة واسعة من تفاعلات البروتين-بروتين، وكذلك تفاعلات البروتين-شريك الارتباط البديل، على شكل مصفوفة بروتينية دقيقة. ثم يتم تصوير هذا التفاعل وتحديد كميته باستخدام أدوات التلوين المناعي التقليدية، بما في ذلك الأجسام المضادة المرتبطة بالإنزيم أو الموسومة بالفلورة.
مصفوفة البروتين ذات الطور العكسي: في هذا النوع من التحليل، تُوضع كمية صغيرة جدًا من مستخلص الخلية أو البلازما أو سوائل الجسم على الشريحة. ثم تُحضن مصفوفة الطور العكسي مع مؤشر محدد واحد، عادةً ما يكون جسمًا مضادًا عالي الجودة ومعتمدًا. صُممت هذه المصفوفة البروتينية كمنصة لطخة نقطية دقيقة الحجم، مما يسمح بالقياس الكمي لمستويات التعبير البروتيني و/أو التعديلات اللاحقة للترجمة في عدد كبير من العينات البيولوجية في وقت واحد. يمكن لشريحة واحدة ذات طور عكسي استيعاب مئات إلى آلاف العينات التي تُطبع في سلسلة من النسخ المتماثلة. يتم الكشف باستخدام توليفات محددة من الأجسام المضادة الأولية والثانوية. نظرًا لصغر كمية البروتين المتاحة، تُستخدم عادةً خطوة تضخيم الإشارة. ثم تُقاس شدة الإشارات الكيميائية الضوئية أو الفلورية أو اللونية الناتجة.
نماذج
انزلاق وسادة واحدة:
الوصف: شريحة Unisart® ثلاثية الأبعاد مزودة بوسادة غشاء نيتروسليلوز واحدة بقياس 51 مم على 21 مم أو 60 مم على 21 مم، وملصق باركود، علبة تحتوي على 25 شريحة
رقم الكتالوج
وسادة واحدة 51 مم × 21 مم، رقم المرجع: 2UNY2GW060021M1G
وسادة واحدة 60 مم على 21 مم، رقم المرجع: 2UNY2GW051021M1G
منزلق ذو وسادتين:
الوصف: شريحة ثلاثية الأبعاد من Unisart® مزودة بطبقتين من غشاء النيتروسليلوز بقياس 20 مم × 20 مم وملصق واحد للرمز الشريطي، علبة تحتوي على 25 شريحة.
رقم الكتالوج: 2UNY2GW020020M2G
منزلق ذو 16 وسادة:
الوصف: شريحة Unisart® ثلاثية الأبعاد مزودة بـ 16 وسادة غشائية من النيتروسليلوز، مقاس 6 مم × 6 مم، علبة تحتوي على 25 شريحة
رقم الكتالوج: 2UNY2GW00600616G
زلاقة Unisart® ثلاثية الأبعاد مع وسادة مخصصة
يمكن إنتاج وسادات مخصصة مختلفة بسهولة باستخدام عملية التصنيع الجديدة. يمكن أن تكون الوسادات بأي حجم ضمن حدود الشريحة الزجاجية القياسية أو ضمن حجم اللوحة 96.
اطلب منا نماذج أولية وعرض سعر للكميات الدنيا
تحليل متعمق
البروتوكولات القياسية:
ملاحظات تمهيدية: يمكن استخدام شرائح Unisart® ثلاثية الأبعاد مع أو بدون حاضنة. جميع الحاضنات القياسية المتوفرة حاليًا متوافقة مع شرائح Unisart® ثلاثية الأبعاد.
يمكن استخدام جهاز التلوين الآلي لخطوات حضانة الشرائح وغسلها. خلال فترات الحضانة الطويلة، يجب توخي الحذر الشديد لتجنب جفاف الشريحة. يُنصح بتركيب مرطب صغير داخل الجهاز و/أو وضع حلقة طاردة للماء حول الوسادات باستخدام أقلام أو أغطية متوفرة لمنع جفاف الشرائح.
مصفوفة البروتين الأمامية:
تختلف نتائج كل فحص وتعتمد بشكل كبير على نوعية الأجسام المضادة المستخدمة. يجب اعتبار البروتوكول المذكور هنا بمثابة دليل عام للخطوات المتبعة.
اختبار الأجسام المضادة الساندويتشية:
يتم تخفيف الأجسام المضادة (10-500 ميكروغرام/مل) في محلول التخفيف (مثل محلول الفوسفات الملحي، تريهالوز 0.5%).
يتم إجراء عملية التبقع باستخدام فوهة زجاجية (بدون تلامس).
تثبيت البروتينات عن طريق التجفيف لمدة 15 دقيقة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية
يُحفظ لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة مع رج خفيف في محلول فوسفات ملحي مُخفف (PBS-T) يحتوي على 0.1% توين و2% ألبومين مصل البقر (BSA). يجب ترطيب سطح النيتروسليلوز بالكامل بعناية في البداية. كما يجب الحرص على إبقاء الشريحة رطبة طوال جميع الخطوات.
الحضانة مع العينة البيولوجية في محلول منظم يحتوي على مثبطات البروتياز (ساعتان / درجة حرارة الغرفة - 4 درجات مئوية).
3 غسلات لمدة 15 دقيقة في محلول الحضانة.
الحضانة مع الجسم المضاد الأولي OV عند درجة حرارة 4 مئوية في محلول PBS-T/2% BSA.
غسل لمدة 3 مرات لمدة 15 دقيقة في محلول PBS-T.
حضانة مع جسم مضاد ثانوي موسوم بالفلورسنت لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة في محلول PBS-T
3 غسلات لمدة 15 دقيقة في محلول PBS-T
غطسة قصيرة في الماء المقطر
تجفيف الشريحة ومسحها ضوئيًا لتحديد كمية شدة الإشارة
مصفوفة البروتين ذات الطور العكسي:
على غرار "مصفوفة البروتين الأمامية"، فإن كل اختبار فريد من نوعه، ويجب اختبار الظروف الخاصة بكل نظام على حدة. فيما يلي مثال كلاسيكي على ذلك.
يتم تحليل العينات البيولوجية في محلول التحلل (مثل محلول لايملي) الذي يحتوي على مثبطات البروتياز.
يتم وضع العينات (1 ملغم/مل) باستخدام أداة وضع العينات (مثل دبوس صلب) وتجفيفها طوال الليل.
لأن خطوة تضخيم الإشارة ضرورية لتطبيق الطور العكسي، يجب تنفيذ خطوات حجب محددة (مثل حجب الأفيدين/البيوتين، وحجب البيروكسيداز) بالإضافة إلى حجب البروتين.
ثم يتم حضن الشرائح في محلول Tris buffer/Tween 0,1% (TBS-T)، 5%BSA لحجب البروتين.
الحضانة مع الجسم المضاد الأولي OV عند درجة حرارة 4 مئوية في محلول TBS-T، 5% BSA.
غسل لمدة 3 مرات لمدة 15 دقيقة باستخدام TBS-T.
حضانة مع الجسم المضاد الثانوي لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة في محلول TBS-T، 5% BSA
3 غسلات لمدة 15 دقيقة لكل منها في محلول TBS-T
خطوات التضخيم وفقًا للنظام المستخدم (مثل تضخيم التيراميد) بما في ذلك خطوات غسل مكثفة
غطسة قصيرة في الماء المقطر
تجفيف الشريحة ومسحها ضوئيًا لتحديد كمية شدة الإشارة

تحديد
معلومات المنتج:
العلامة التجارية: يونيسارت®