Thermo Fisher، 16119، طقم سحب واكتشاف Active Cdc42

مجموعة سحب وكشف Cdc42 النشط: مجموعة Thermo Scientific Active Cdc42 Pull-Down and Detection Kit هي مجموعة كاملة للإثراء الانتقائي والكشف عن GTP المرتبط بـ Cdc42 GTPase من خلال تفاعل بروتيني محدد مع مجال ربط البروتين Pak1.
تتضمن مجموعة الكشف عن بروتين Cdc42 النشط (Active Cdc42 Pull-Down and Detection Kit) نطاق ربط البروتين GST-Pak1 النقي (PBD)، وراتنج الأغاروز الغلوتاثيون، وضوابط إيجابية وسلبية (GTPγS وGDP على التوالي)، ومحلول التحلل/الربط/الغسل، والجسم المضاد الأولي لـ Cdc42، ومحلول العينة، وأعمدة الطرد المركزي، وأنابيب التجميع. وقد تم التحقق من صحة المجموعة باستخدام مستخلصات من خلايا NIH 3T3، وهي سلالة خلوية معروفة بنشاطها القوي لبروتين Cdc42.
ميزات مجموعة Active Cdc42 للسحب والكشف:
• حساسية ودقة عاليتان - تضمن الكواشف المُحسّنة، والأجسام المضادة النوعية لـ Cdc42، وإجراءات لطخة ويسترن، ضوابط دقيقة ونتائج شبه كمية
• تم التحقق من صحتها - تم اختبارها وظيفيًا للكشف عن Cdc42 لضمان الجودة والأداء
• متوافق - فعال مع مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا من مصادر الفئران والجرذان والبشر. التطبيقات:
• تتبع تنشيط إنزيم Cdc42 GTPase أثناء تمايز الخلايا، والهجرة، والانقسام، وإعادة ترتيب الهيكل الخلوي
• دراسة تنشيط Cdc42 أثناء تكوين الأرجل الخيطية
• مراقبة نشاط Cdc42 بعد التحفيز بعوامل النمو
• فحص مثبطات الجزيئات الصغيرة لتأثيرها على نشاط Cdc42: تم التحقق من صحة مجموعة الكشف عن Cdc42 النشط من حيث وظيفة وخصوصية طريقة إثراء Cdc42 النشط باستخدام مستخلصات خلوية مُعالجة بـ GTPγS لتنشيط Cdc42 الداخلي، ومقارنتها بمستخلصات مُعالجة بـ GDP لتعطيل GTPase الصغير. يحبس العلاج بـ GTPγS بروتين Cdc42 في شكله النشط المرتبط بـ GTP، مما ينتج عنه إشارة قوية عند وجود Cdc42 الداخلي. يدفع العلاج بـ GDP بروتين Cdc42 إلى الحالة غير النشطة المرتبطة بـ GDP، مما ينتج عنه إشارة ضئيلة أو معدومة بغض النظر عن مستويات بروتين Cdc42. هذه المجموعة مُحسَّنة للكشف بتقنية Western blot باستخدام جسم مضاد ثانوي مُقترن بـ HRP (جسم مضاد IgG مضاد للفأر من الماعز، رقم القطعة 31430) وركيزة Thermo Scientific SuperSignal West Pico الكيميائية المتألقة (رقم القطعة 34080). تحتوي المجموعة على مكونات كافية لإجراء 30 اختبار سحب البروتين.
خلفية Cdc42: تؤدي بروتينات GTPases من عائلة Rho العديد من الوظائف الخلوية، بما في ذلك الإشارات الخلوية، وتنظيم النسخ، وتنظيم الهيكل الخلوي للأكتين. تتألف هذه العائلة من بروتينات Rho (RhoA، وRhoB، وRhoC)، وRac (Rac1، وRac2، وRac3، وRhoG)، وCdc42 (Cdc42 وG25K)، وRnd (Rnd1، وRnd2، وRhoE/Rnd3)، وعائلة RhoBTB، وعائلة Miro. تُمكّن هذه البروتينات من نقل الإشارات من غشاء البلازما إلى السيتوسول عبر مستقبلات البروتين المقترن بالبروتين G (GPCR)، ومستقبلات التيروزين كيناز، ومستقبلات السيتوكينات، ومستقبلات الالتصاق. يتم الارتباط بغشاء البلازما من خلال تعديلات دهون جيرانيل جيرانيل في الطرف الكربوكسيلي للبروتين. يؤدي تنشيط Cdc42 إلى بلمرة خيوط الأكتين وتكوين الأرجل الخيطية.
تُعدّ عائلة Cdc42 الفرعية من بروتينات RhoGTPase أقل دراسةً من عائلتي Rho وRac. يتم تنشيط كل من Cdc42 وRac1 عبر إشارات كيناز مستقبلات التيروزين، مما يؤدي إلى تنشيط مسار كيناز الإجهاد SAPK وp38. كما يتم تنشيط Cdc42 بواسطة عامل الجذب الكيميائي fMLP في العدلات. يُنشّط الفيبرونيكتين كلاً من Cdc42 وRac1 لتحفيز انتشار الخلايا، ويؤدي التحفيز بواسطة TNF-α وIL-1 إلى تغييرات في الهيكل الخلوي للأكتين. يوجد تداخل كبير بين Cdc42 وRac1، حيث يعملان في مسارات متداخلة، وفي بعض الحالات، قد يعمل Cdc42 قبل Rac1 أثناء نقل الإشارة. من بين البروتينات المؤثرة الرئيسية لـ Cdc42: Pak1 وN-WASP وIQGAP. يُعدّ Pak1 كينازًا يُشارك في تنشيط JNK في مسار SAPK المُضاد للإجهاد. أما N-WASP فهو مُؤثر يُحفز تكوين الأرجل الخيطية، ويتفاعل IQGAP مع خيوط الأكتين F. في الخلايا العصبية المُتمايزة، يلعب Cdc42 دورًا فعالًا في نمو المحاور العصبية. مع ذلك، يُمكن لعائلة Rho من بروتينات GTPases أن تعمل بشكل مُنشط أثناء إشارات الخلية، وبشكل مُثبط أثناء التمايز.
المزيد من بيانات المنتج
• قياس تنشيط البروتينات الصغيرة الرابطة لـ GTP عبر المؤثرات النهائية الخاصة بها: اختبار تحديد كمية البروتين
المقترن: HRP
الوصف: طقم بيرس النشط CDC42 للسحب والكشف
للاستخدام مع (التطبيق): سحب لأسفل
محتويات المجموعة: جسم مضاد لـ Cdc42، 5 وحدات، 300 ميكرولتر، أنابيب تجميع، 90 أنبوبًا، GDP (100X)، 50 ميكرولتر، راتنج أجاروز الغلوتاثيون، 3 مل، بروتين اندماج GST-Pak1-RBD، قارورة واحدة، GTPγS (100X)، 50 ميكرولتر، محلول التحلل/الربط/الغسل (1X)، 100 مل، محلول عينة SDS (2X)، 1.
5 مل، أكواب دوارة، 30 كوبًا
الكمية: 30 تفاعلاً
خصائص الركيزة: ركيزة قائمة على البروتين
نوع الركيزة: ركيزة GTPase
الهدف: الكينازات (متعددة)، فوسفودايسترازات، أدينوسين ثلاثي الفوسفات، جي تي فوسفاتازات، فوسفاتازات
طريقة الكشف: لطخة ويسترن، التلألؤ الكيميائي
مجموعة اختبار المناعة: عمود الدوران
نوع الملصق: بدون ملصق
حجم الوحدة: كل وحدة