Thermo Fisher، 4456740، مزيج ERCC RNA Spike-In من Invitrogen™

يمكن أن يُعزى التباين في بيانات التعبير الجيني للرنا إلى عوامل متعددة، تشمل جودة المادة الأولية، ومستوى كثافة الخلايا، وكمية الرنا المُستخلص، والمنصة المستخدمة، والقائم بالتجربة. وللتحكم في هذه المصادر للتباين، طوّر اتحاد ضوابط الرنا الخارجية (ERCC)، وهو مجموعة مُخصصة من منظمات أكاديمية وخاصة وعامة، تحت إشراف المعهد الوطني للمعايير والتكنولوجيا (NIST)، مجموعةً موحدةً من ضوابط الرنا الخارجية. تتكون هذه الضوابط من مجموعة من النسخ غير الموسومة والمُذيّلة بذيل متعدد الأدينين، والمُصممة لإضافتها إلى تجربة تحليل الرنا بعد عزل العينة، وذلك لقياسها وفقًا لمعايير أداء مُحددة. وحتى تصميم هذه الضوابط المقبولة عالميًا، كان من الصعب إجراء دراسة شاملة لمقاييس الأداء التحليلي الأساسية. من العلامة التجارية الموثوقة للمواد الكيميائية عالية الجودة، تُقدم Ambion™ ERCC Spike-In Control Mixes مزيجًا جاهزًا للاستخدام التجاري، يتكون من 92 نسخة جينية، مُشتقة وقابلة للتتبع من بلازميدات الحمض النووي المعتمدة من المعهد الوطني للمعايير والتكنولوجيا (NIST). صُممت هذه النسخ الجينية ليتراوح طولها بين 250 و2000 نيوكليوتيد، مما يُحاكي الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) الطبيعي في حقيقيات النوى.
أهم ميزات المنتج: تحقيق معيار موحد لمقارنة البيانات عبر تجارب التعبير الجيني
• قياس حساسية (الحد الأدنى للكشف) والنطاق الديناميكي للتجربة
• قياس التعبير الجيني التفاضلي: إطلاق العنان لإمكانيات تحليل الحمض النووي الريبوزي (RNA). يُمكن لتحليل الحمض النووي الريبوزي، بما في ذلك تحديد أنماط التعبير الجيني ومسح النسخ الكامل، أن يُسهم في فهم أفضل لأنماط التعبير في الحالات المرضية، ويُوفر رؤى أعمق حول المسارات البيولوجية والآليات الجزيئية التي تُنظم مصير الخلية ونموها وتطور المرض. تُعدّ الطرق التقليدية لتحليل الحمض النووي الريبوزي، مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qRT-PCR) والمصفوفات الدقيقة، راسخة، ولكنها تُستبدل حاليًا بتقنيات التسلسل من الجيل التالي، وهي بديل رقمي عالي الإنتاجية. ونظرًا لأن كل طريقة تتطلب منصات متعددة، ومع الحاجة إلى مقارنة عينات متنوعة عبر منصات مختلفة حول العالم، فإن وجود معيار موحد لمقارنة البيانات يُعدّ ضروريًا. ومع توسع إمكانيات تحليل الحمض النووي الريبوزي، ستزداد أهمية إنشاء عرض موحد للبيانات.
حقق وقارن النتائج بدقة مؤكدة. تُستخدم ضوابط Ambion™ ERCC RNA Spike-In لإنشاء قياس أساسي معياري للحمض النووي الريبوزي (RNA) ضمن التجربة الواحدة وعبر تجارب متعددة تُجرى باستخدام عينات ومنصات متنوعة. باستخدام تركيبتين من مزيج الإضافة (الشكل 1)، يمكن فحص قياسات مختلفة، مثل الحساسية أو النطاق الديناميكي، لتقييم معايير مختلفة في تجربة واحدة أو عبر تجارب متعددة (الشكل 2). علاوة على ذلك، يمكن حساب نسب تغير التعبير بين عينتين بدرجة عالية من الثقة باستخدام العلاقة المتوافقة للغاية بين ExFold RNA Spike-In 1 و ExFold RNA Spike-In 2 (الشكل 3). تُحدد القياسات من خلال التركيزات المولية المعروفة لكل نسخة جينية ضمن مزيج الإضافة، ومن خلال ربط المزيجين باستخدام مجموعة من النسب عبر 4 مجموعات فرعية مختلفة من النسخ الجينية الـ 92. تُعد هذه الضوابط مثالية لتجارب التسلسل من الجيل التالي، مثل نظام SOLiD™، ومنصات المصفوفات الدقيقة المدعومة مثل Illumina™ Sentrix™ BeadChip.
اختر من بين خيارات مرنة لتكوينات مجموعة ERCC. سواء كنت تقيس النطاق الديناميكي أو نسبة التغير في التعبير الجيني، فإنّ مزيج التحكم الداخلي ERCC من Ambion™ متوفر بتكوينين لتلبية احتياجاتك التجريبية. استخدم مزيج ERCC الداخلي لتحديد النطاق الديناميكي والحد الأدنى للكشف على منصتك، واستخدم مزيج ERCC ExFold الداخلي لتقييم دقة قياسات التعبير الجيني التفاضلي.
مزيج ERCC RNA Spike-In 1* مزيج ExFold Spike-In 1* مزيج ExFold Spike-In 2* ماء خالٍ من النيوكلياز مزيج ERCC RNA Spike-In (رقم المنتج 4456740) 10 ميكرولتر——1.
75 ملي إل إي آر سي سي إكس فولد آر إن إيه سبايك-إن ميكسز (رقم الكتالوج 4456739) - 10 ميكرولتر 10 ميكرولتر 1.
٧٥ مل* على الرغم من أن مزيج ERCC RNA Spike-In Mix 1 ومزيج ExFold Spike-In Mix 1 يحتويان على نفس تركيبة نسخ ERCC، فلا تستبدل مزيج ERCC RNA Spike-In Mix 1 بمزيج ExFold Spike-In Mix 1 لتقييم التغير النسبي. استخدم فقط مزيج ExFold Spike-In Mix 1 وMix 2 من نفس رقم دفعة التصنيع.
للاستخدام البحثي فقط. غير مخصص للاستخدام في إجراءات التشخيص.
للاستخدام مع (التطبيق): تسلسل الجيل التالي
يشمل: قالب (قوالب) التحكم
خط الإنتاج: أمبيون™
نوع المنتج: مزيج ERCC RNA Spike-In
الكمية: طقم واحد
نوع التحكم: تحكم الحمض النووي الريبي
التنسيق: أنبوب
حجم الوحدة: كل وحدة