Thermo Fisher، 89836، محلول DNase I (وحدة واحدة/ميكرولتر)، خالٍ من RNase

محلول DNase I (وحدة واحدة / ميكرولتر)، خالٍ من RNase، يقوم Thermo Scientific DNase I بإزالة الحمض النووي غير المرغوب فيه من مستخلصات الخلايا لتحسين كفاءة استخلاص البروتين.
خصائص إنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز I الخالي من إنزيم RNase:
• يُحلل ويزيل الحمض النووي غير المرغوب فيه من العينات
• يقطع الحمض النووي أحادي السلسلة وثنائي السلسلة
• متوافق مع كواشف تحلل الخلايا من Thermo Scientific Pierce
• يقلل من لزوجة مستخلصات البكتيريا (مستخلصات البروتين) لتسهيل عملية السحب بالماصة. إنزيم ديوكسي ريبونوكلياز I (DNase I) هو عديد ببتيد واحد مُغلّف بالجليكوزيل، يعمل على تحليل الحمض النووي أحادي وثنائي السلسلة غير المرغوب فيه. يعمل هذا الإنزيم عن طريق شطر الحمض النووي إلى شظايا فوسفات ثنائي النوكليوتيد 5' وشظايا قليلة النوكليوتيدات. يُضاف إنزيم DNase I عادةً إلى كواشف تحلل الخلايا لإزالة اللزوجة الناتجة عن محتوى الحمض النووي في مستخلصات الخلايا البكتيرية، أو لإزالة قوالب الحمض النووي من الحمض النووي الريبوزي (RNA) الناتج عن النسخ في المختبر. يُعد إنزيم DNase الخالي من إنزيم RNase مفيدًا لأي تطبيق يتطلب هضم الحمض النووي، حيث يكون من الضروري تجنب إتلاف الحمض النووي الريبوزي (RNA).
معلومات عامة حول استخدام إنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز الأول (DNase I):
• أيونات الكالسيوم ضرورية لنشاط DNase I. قد توجد كميات ضئيلة من Ca++ بتركيز عالٍ بما يكفي ليكون DNase I نشطًا، ومع ذلك فإن استخدام EGTA أو المحاليل المنظمة الخالية من الكالسيوم يمكن أن يقلل من نشاط DNase I إلى مستويات غير قابلة للكشف.
• مستويات عالية (i.
أي أن تركيز 100 ملي مولار من الأيونات أحادية التكافؤ مثل Na+ و K+ سيؤدي إلى انخفاض نشاط إنزيم DNase I
• يتم تعطيل إنزيم DNase I عن طريق التسخين إلى 65 درجة مئوية لمدة 10 دقائق
• وحدة كونيتز: وحدة كونيتز هي كمية الإنزيم المطلوبة لإحداث زيادة قدرها 0.
001 A260nm/min/mL عند 25 درجة مئوية في 0.
1 مولار NaOAc، درجة الحموضة 5.
0 بسبب تحلل الحمض النووي عالي التبلمر
• وحدات فحص التحلل: يتم تعريف الوحدة الواحدة على أنها كمية الإنزيم المطلوبة لتحلل 1 ميكروغرام من الحمض النووي البلازميدي بالكامل في 10 دقائق عند 37 درجة مئوية في 10 ملي مولار Tris·HCl، درجة الحموضة 7.
5، 50 ملي مولار MgCl2، 13 ملي مولار CaCl2.
تحديد:
• الكمية: 1000 وحدة (1 مل)
• التركيز: وحدة واحدة/ميكرولتر ± 20%
• تعريف الوحدة: وحدة واحدة تُحلل تمامًا 1 ميكروغرام من الحمض النووي البلازميدي في 10 دقائق عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. وحدة واحدة من إنزيم DNase I تعادل 0.
3 وحدات كونيتز.
• تلوث RNase: لم يتم الكشف عن أي نشاط ريبونوكلياز بناءً على الحضانة مع نسخة RNA.
• المصدر: بكتيريا الإشريكية القولونية التي تحتوي على جين مستنسخ يشفر إنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز I البقري
• الوزن الجزيئي: حوالي 29000
• التركيبة: ديوكسي ريبونيوكلياز I البقري في 50 ملي مولار من Tris-HCl (الأس الهيدروجيني 7).
5) 10 ملي مولار من كلوريد الكالسيوم، 50% جلسرين
• مرفق مع: 1 مل من محلول التفاعل 10X 100 ملي مولار Tris-HCl (الأس الهيدروجيني 7).
5)، 25 ملي مولار من كلوريد المغنيسيوم، 1 ملي مولار من كلوريد الكالسيوم، 50 ملي مولار من EDTA، الإنزيم: ديوكسي ريبونيوكلياز
الكمية: 1000 وحدة
الشكل: سائل
نوع المنتج: إنزيم تحلل الخلايا
حجم الوحدة: كل وحدة