Product Description
مجموعة عزل بروتينات سطح الخلية Pierce™ Thermo Scientific™ هي مجموعة كاملة من الكواشف للبيوتين الانتقائي والتنقية اللاحقة لبروتينات سطح الخلية الثديية لاستبعاد البروتينات داخل الخلايا.
مميزات مجموعة عزل بروتينات سطح الخلية:
• يعزل بروتينات سطح الخلية - مما يقلل من تعقيد البروتين الخلوي الكلي
• يسترجع البروتينات الموسومة بكفاءة عالية - يسمح البيوتين القابل للتحلل باستخلاص ما يقرب من 100% من بروتينات سطح الخلية المعزولة
• سهولة الاستخدام - جميع الكواشف متوفرة في مجموعة واحدة، بالإضافة إلى تعليمات كاملة لوضع العلامات، وتحليل الخلايا، وتنقية بروتينات غشاء سطح الخلية
• تطبيقات التلطيخ الغربي - يتم تحميل البروتينات المستخلصة في محلول SDS-PAGE مباشرة على هلامات البولي أكريلاميد
• نظام قوي - بروتوكول مصمم لأنواع مختلفة من الخلايا، بما في ذلك NIH 3T3 وHeLa وC6 وA431. تعمل هذه المجموعة بكفاءة على وسم البروتينات التي تحتوي على بقايا ليسين متاحة وتعرض كافٍ للسطح الخارجي للخلايا. تستخدم عملية العزل كاشف بيوتين قابل للتحلل وغير منفذ للخلايا (Sulfo-NHS-SS-Biotin) لوسم الأمينات الأولية المكشوفة للبروتينات على سطح الخلايا السليمة الملتصقة أو المعلقة. بعد ذلك، تُجمع الخلايا المعالجة وتُحلل، ثم تُنقى البروتينات السطحية الموسومة باستخدام راتنج أجاروز نيوترافيدين من Thermo Scientific. تحتوي بروتينات سطح الخلية المعزولة على علامة صغيرة غير تفاعلية من الأمينات الأولية الموسومة أصلاً، ولكنها لم تعد مرتبطة بالبيوتين (يبقى البيوتين مرتبطًا بالراتنج). تحتوي المجموعة على كمية كافية من الكواشف لثماني تجارب، تتضمن كل منها أربع قوارير T75 تحتوي على خلايا متصلة.
استُخدمت مجموعة عزل بروتينات سطح الخلية بنجاح لوسم وتنقية بروتينات سطح الخلية. في إحدى التجارب، عُولجت خلايا هيلا بـ Sulfo-NHS-SS-Biotin أو بدونها، وخضعت الخلايا للمعالجة وفقًا لإجراءات المجموعة. حُللت الأجزاء المُجمعة، بما في ذلك الإذابة، والسائل المار، وهلام ما بعد الإذابة، باستخدام تقنية ويسترن بلوت. حُددت أربعة بروتينات سطحية في جزء الإذابة للخلايا المُعالجة بعلامة البيوتين. شملت هذه البروتينات مستقبل عامل نمو البشرة (EGFR)، ومستقبل عامل النمو الشبيه بالأنسولين-1 بيتا (IGF-1β)، والإنترغرين 1، والإنترغرين 5. على النقيض تمامًا، لم يُحدد أي من هذه البروتينات في جزء الإذابة للخلايا غير الموسومة؛ إذ وُجدت البروتينات غير الموسومة حصريًا في السائل المار. كما حُددت بعض بروتينات سطح الخلية في أجزاء السائل المار من الخلايا الموسومة. من المُرجح أن هذه البروتينات لم تُوسم بسبب الإعاقة الفراغية. وُجدت كمية ضئيلة من البروتين المُستخلص في أجزاء الهلام بعد عملية الاستخلاص، مما يشير إلى استعادة ما يقارب 100% من البروتينات المُستخلصة. كما تم الكشف عن كمية ضئيلة من بروتين الصدمة الحرارية 90 (Hsp90) في جزء الاستخلاص لجميع العينات المختبرة، مما يُثبت خصوصية العلامة للبروتينات السطحية للخلايا مقارنةً بالبروتينات الداخلية.
المخزن المؤقت: مخزن التحلل
الكمية: مجموعة من 8 تفاعلات
نوع الكاشف: محلول تحلل الخلايا، محلول منظف، تجزئة المكونات الخلوية
يكفي لـ: 8 تفاعلات
الشكل: سائل، مسحوق
خط الإنتاج: بيرس™
نوع المنتج: مجموعة عزل البروتين
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924