أعمدة الطرد المركزي NAb™ Protein L من Thermo Fisher، رقم 89955، سعة 0.2 مل

أعمدة الدوران NAb™ Protein L، 0.
تُعد أعمدة Thermo Scientific NAb Protein L Spin Columns سعة 2 مل مناسبة لتنقية الأجسام المضادة بسرعة وعلى نطاق صغير من أنواع مختلفة من العينات. يحتوي كل عمود على 0.
يُمكّن استخدام 2 مل من راتنج البروتين المُثبّت من تنقية سريعة لـ 100-1000 ميكروغرام من الغلوبولين المناعي IgG من 25-500 ميكرولتر من المصل أو أي عينة أخرى. وتختلف الكمية الفعلية للغلوبولين المناعي IgG المُنقّى تبعًا لنوع العينة ونوع عمود الطرد المركزي المُستخدم.
يتكون راتنج بيرس بروتين إل أغاروز من بروتين إل مُعاد التركيب، مُثبَّت تساهميًا على أغاروز عالي الجودة مُتشابك بنسبة 6% (CL-6B). يوفر هذا النوع من الراتنج مزيجًا مثاليًا من الخصائص الكروماتوغرافية، مما يُتيح تنقية عالية النقاء والإنتاجية للغلوبولينات المناعية المستهدفة. تتميز حبيبات الأغاروز بخصائص فيزيائية وكيميائية مناسبة للعديد من أنظمة التنقية بالتقارب.
خصائص بروتين بيرس إل أجاروز:
•بروتين L - يُعد بروتين L المُثبَّت مثاليًا للتنقية الانتقائية للأجسام المضادة البشرية والفأرية التي تحتوي على سلاسل خفيفة من نوع كابا.
• راتنج الأغاروز – الدعامة عبارة عن أغاروز متشابك بنسبة 6% (CL-6B)، وهو الراتنج الأكثر شيوعًا لطرق تنقية البروتين بالتقارب
• خامل ومستقر - تعمل طريقة التصنيع الفائقة على تثبيت البروتين L بروابط تساهمية خالية من الشحنات ومقاومة للترشيح، مما يؤدي إلى انخفاض الارتباط غير المحدد ويتيح استخدامات متعددة دون انخفاض في الإنتاجية
• السعة القياسية – يحتوي راتنج Pierce Protein L Agarose على حمولة عادية من بروتين L المثبت، مما يوفر قدرة ربط من 5 إلى 10 ملغ من IgG البشري / مل من الراتنج. التطبيقات:
• تنقية الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسائل التي ترتبط بشكل ضعيف ببروتين A أو بروتين G أجاروز
• تنقية الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من السوائل الطافية للمزارع المدعمة بمصل البقر
• فحوصات الترسيب المناعي والترسيب المناعي المشترك لبروتين L
• تنقية أجزاء ScFv وFab التي تحتوي على سلاسل خفيفة من نوع كابا. البروتين L هو بروتين رابط للغلوبولين المناعي (36 كيلو دالتون) مصدره بكتيريا Peptostreptococcus magnus، ولكنه يُنتج الآن بتقنية إعادة التركيب في بكتيريا الإشريكية القولونية. على عكس البروتين A والبروتين G، اللذين يرتبطان بشكل أساسي من خلال مناطق Fc (أي
يرتبط البروتين L (أي السلسلة الثقيلة) من الغلوبولينات المناعية بالغلوبولينات المناعية من خلال تفاعلات مع السلاسل الخفيفة. ولأن أي جزء من السلسلة الثقيلة لا يشارك في تفاعل الارتباط، فإن البروتين L يرتبط بنطاق أوسع من فئات الغلوبولينات المناعية مقارنةً بالبروتين A أو G. يرتبط البروتين L بممثلين عن جميع فئات الغلوبولينات المناعية، بما في ذلك IgG وIgM وIgA وIgE وIgD. كما ترتبط أجزاء السلسلة المتغيرة المفردة (ScFv) وأجزاء Fab بالبروتين L.
على الرغم من قدرة الارتباط الواسعة هذه فيما يتعلق بفئات الغلوبولين المناعي، فإن البروتين L ليس بروتينًا يرتبط بالغلوبولين المناعي بشكل عام. يقتصر ارتباط البروتين L بالغلوبولينات المناعية على تلك التي تحتوي على سلاسل خفيفة من نوع كابا (أي سلاسل خفيفة من نوع كابا).
(أي، سلسلة كابا من نطاق VL). في البشر والفئران، تسود سلاسل كابا الخفيفة. أما باقي الغلوبولينات المناعية فلها سلاسل لامدا خفيفة. علاوة على ذلك، فإن البروتين L فعال في الارتباط بأنواع فرعية معينة فقط من سلاسل كابا الخفيفة. على سبيل المثال، يرتبط بالأنواع الفرعية VkI وVkIII وVkIV البشرية، ولكنه لا يرتبط بالنوع الفرعي VkII. ويقتصر ارتباط الغلوبولينات المناعية في الفئران على تلك التي تحتوي على سلاسل VkI الخفيفة.
بالنظر إلى هذه المتطلبات المحددة للارتباط الفعال، فإن التطبيق الرئيسي لبروتين L المُثبَّت هو تنقية الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من السائل الاستسقائي أو السائل الطافي للمزرعة، والتي من المعروف أنها تحتوي على السلسلة الخفيفة كابا. يُعد بروتين L مفيدًا للغاية لتنقية الأجسام المضادة وحيدة النسيلة الحاوية على VLk من السائل الطافي للمزرعة، لأنه لا يرتبط بالغلوبولينات المناعية البقرية الموجودة في مصل الوسط المُكمِّل. كما أن بروتين L لا يتداخل مع موقع ارتباط المستضد في الجسم المضاد، مما يجعله مفيدًا في فحوصات الترسيب المناعي، حتى باستخدام IgM.
يُحضّر بروتين بيرس L أغاروز باستخدام تقنية اقتران أمينولينك من شركة ثيرمو ساينتيفيك، والتي توفر مزايا عديدة مقارنةً بالطرق التقليدية لتثبيت الليجاندات. ينتج عن تثبيت أمينولينك اقتران بين مونومرات السكر في حبيبات الأغاروز وبقايا الليسين الأصلية على بروتين A عبر روابط أميدية بسيطة. على عكس التثبيت التقليدي باستخدام بروميد السيانوجين (CNBr)، لا تُدخل طريقة أمينولينك أي مجموعات كيميائية جديدة قد تُسبب ارتباطًا غير مرغوب فيه وغير نوعي، وتُنتج رابطة مستقرة وغير قابلة للانعكاس عمليًا. والنتيجة هي راتنج ذو قدرة ارتباط عالية يحتفظ ببروتين L المُثبّت وظيفيًا خلال جولات متعددة من تنقية الأجسام المضادة.
يُعدّ راتنج Pierce Protein L Agarose راتنجًا متعدد الاستخدامات لتنقية أنواع IgG من الثدييات التي تحتوي على سلاسل خفيفة محددة من نوع كابا. ويُعتبر Protein L مناسبًا بشكل خاص لعزل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من نوع IgG VkI في الفئران، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة من نوع IgG VkI وVkIII وVkIV في الإنسان.
خصائص الأغاروز المتشابك بنسبة 6% (CL-6B):
• دعم استقرار درجة الحموضة: من 2 إلى 14 (على المدى القصير)؛ من 3 إلى 13 (على المدى الطويل)
• متوسط ​​حجم الجسيمات: من 45 إلى 165 ميكرون
• حد الاستبعاد: من 10,000 إلى 4,000,000 دالتون
• أقصى معدل تدفق حجمي: حوالي 1 مل/دقيقة (لعمود قطره 1 سم)
• أقصى سرعة خطية: 30 سم في الساعة
• أقصى ضغط: أقل من 25 رطل لكل بوصة مربعة (1.
5 بار)، وهو أقصى انخفاض في الضغط عبر العمود يمكن أن يتحمله الراتنج (ملاحظة: قد يقيس ضغط المقياس المشار إليه في جهاز كروماتوغرافيا السائل الضغط الكلي للنظام بدلاً من انخفاض الضغط عبر العمود). مزيد من بيانات المنتج
• استخدام البروتينات الرابطة للأجسام المضادة لتنقية الأجسام المضادة. الوصف: أعمدة الدوران NAb Protein L، 0.
2 مل
هدف التنقية: الأجسام المضادة من نوع Ig
الكمية: 10 أعمدة
نوع العمود: راتنج الأغاروز، التقارب
التنسيق: عمود طرد مركزي دقيق
خط الإنتاج: NAb™
المرحلة الثابتة: البروتين L
حجم الوحدة: كل وحدة