Thermo Fisher, A20106, Alexa Fluor™ 647 NHS Ester (Succinimidyl Ester)

يُعدّ 5 ملغ من صبغة Alexa Fluor™ 647 صبغةً ساطعةً وثابتةً ضوئيًا في نطاق الأشعة تحت الحمراء البعيدة، وتتميز بإثارتها المثالية لخط الليزر 633 نانومتر. تُستخدم هذه الصبغة لتوليد إشارات مستقرة في التصوير وقياس التدفق الخلوي، وهي قابلة للذوبان في الماء وغير حساسة لدرجة الحموضة من 4 إلى 10. لا يمكن رؤية تألق هذه الصبغة ذات الطول الموجي الطويل بالعين المجردة، ولكن يمكن رصده بسهولة بواسطة معظم أنظمة التصوير. بالإضافة إلى تركيبات الصبغة التفاعلية، نوفر صبغة Alexa Fluor™ 647 مرتبطة بمجموعة متنوعة من الأجسام المضادة والببتيدات والبروتينات والمتتبعات وركائز التضخيم المُحسّنة لوسم الخلايا والكشف عنها (للمزيد من المعلومات).
يُعدّ إستر NHS (أو إستر السكسينيميديل) لصبغة Alexa Fluor™ 647 الأداة الأكثر شيوعًا لربط هذه الصبغة بالبروتينات أو الأجسام المضادة. يمكن استخدام إسترات NHS لوسم الأمينات الأولية (R-NH2) في البروتينات، والنيوكليوتيدات المعدلة بالأمينات، والجزيئات الأخرى المحتوية على الأمينات. سيُظهر مُقترن Alexa Fluor™ الناتج تألقًا أكثر سطوعًا وثباتًا ضوئيًا أكبر من مُقترنات الفلوروفورات الأخرى ذات الطيف المماثل.
معلومات تفصيلية حول إستر NHS من AlexaFluor™: علامة الفلوروفور: صبغة Alexa Fluor™ 647، المجموعة التفاعلية: إستر NHS، التفاعلية: الأمينات الأولية على البروتينات والروابط، والنيوكليوتيدات المعدلة بالأمين، طيف الإثارة/الانبعاث للمقترن: 651/672 نانومتر، معامل الامتصاص: 270,000 سم⁻¹ مول⁻¹، أصباغ مشابهة طيفيًا: Cy5™، الوزن الجزيئي: ∼1250. تفاعل الاقتران النموذجي: يمكنك اقتران الكواشف المتفاعلة مع الأمينات مع أي بروتين أو ببتيد تقريبًا (البروتوكول المرفق مُحسَّن للأجسام المضادة IgG). يمكنك تعديل التفاعل لأي كمية من البروتين، ولكن يجب أن يكون تركيز البروتين 2 ملغم/مل على الأقل للحصول على أفضل النتائج. نوصي بتجربة ثلاث درجات مختلفة من الوسم، باستخدام ثلاث نسب مولية مختلفة من الكاشف التفاعلي إلى البروتين.
يتم عادةً إذابة إستر Alexa Fluor™ NHS في ثنائي ميثيل فورماميد (DMF) عالي الجودة لا مائي أو ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) (D12345)، ويتم إجراء التفاعل في 0.
1–0.
محلول منظم من بيكربونات الصوديوم بتركيز 2 مولار، درجة الحموضة 8.
3، في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة. نظرًا لأن قيمة pKa للأمين الطرفي أقل من قيمة pKa لمجموعة إبسيلون-أمينو في الليسين، يمكنك تحقيق وسم أكثر انتقائية لطرف الأمين باستخدام محلول منظم أقرب إلى درجة حموضة متعادلة.
راجع دليل المستخدم للاطلاع على تعليمات الذوبان.
تنقية الأجسام المضادة المُرتبطة: تُفصل الأجسام المضادة الموسومة عادةً عن صبغة Alexa Fluor™ الحرة باستخدام عمود ترشيح هلامي، مثل Sephadex™ G-25 أو BioGel™ P-30 أو ما يُماثلهما. بالنسبة للبروتينات الأكبر أو الأصغر حجمًا، يُنصح باختيار وسط ترشيح هلامي ذي حدّ مناسب للوزن الجزيئي أو التنقية عن طريق الغسيل الكلوي. نوفر العديد من مجموعات التنقية المُحسّنة لكميات مختلفة من الأجسام المضادة المرتبطة: مجموعة تنقية الأجسام المضادة المرتبطة لـ 0.
مجموعة تنقية الأجسام المضادة المقترنة (A33086) 5-1 ملغ، مجموعة تنقية الأجسام المضادة المقترنة لكميات 20-50 ميكروغرام (A33087)، مجموعة تنقية الأجسام المضادة المقترنة لكميات 50-100 ميكروغرام (A33088). تعرّف على المزيد حول وسم البروتينات والأجسام المضادة. نقدم مجموعة واسعة من مجموعات وسم الأجسام المضادة والبروتينات من Molecular Probes™ لتناسب المواد الأولية وإعدادات تجربتك. اطلع على مجموعات وسم الأجسام المضادة أو استخدم أداة اختيار كيمياء الوسم للاطلاع على خيارات أخرى. لمعرفة المزيد حول مجموعات الوسم، اقرأ "مجموعات وسم البروتينات والأحماض النووية - القسم 1".
2 في دليل Molecular Probes™.
سنصنع لك مُرَكَّبًا مُخصَّصًا. إذا لم تجد ما تبحث عنه في كتالوجنا الإلكتروني، فسنُحضِّر لك مُرَكَّبًا مُخصَّصًا من الأجسام المضادة أو البروتينات. خدمة الاقتران المُخصَّصة لدينا فعّالة وسرية، ونحن نضمن جودة عملنا. نحن حاصلون على شهادة ISO 13485:2000.
الانبعاث: 672 نانومتر
الإثارة: 651 نانومتر
للاستخدام مع (التطبيق): كيمياء الوسم، ووسم البروتينات، والربط المتشابك
العلامة أو الصبغة: أليكسا فلور™ 594
الوزن الجزيئي (جم/مول): ∽1250 كيلو دالتون
نوع المنتج: إستر NHS (إستر سكسينيميديل)
النقاء: 98% عند 647 نانومتر (HPLC)
الكمية: 5 ملغ
اللون: أزرق
نطاق الرقم الهيدروجيني: من 4 إلى 10
حجم الوحدة: كل وحدة