Product Description
مجموعة تركيب الحمض النووي الريبوزي الموجه (gRNA) الدقيقة: تُعدّ هذه المجموعة نظامًا متكاملًا لتركيب الحمض النووي الريبوزي الموجه (gRNA) بسرعة، وهو جاهز للارتباط ببروتين TrueCut™ Cas9 v2 لتكوين مركب بروتين Cas9/gRNA الريبونوكليوبروتيني (Cas9 RNP) الجاهز للنقل. وقد تم اختبار هذا المركب، مع بروتين TrueCut Cas9 v2، على مجموعة متنوعة من خطوط الخلايا المعلقة والملتصقة، حيث بلغت كفاءة القطع أكثر من 70%، دون أي مؤشرات على السمية. تبدأ العملية باثنين من قليل النوكليوتيدات أحادية السلسلة القصيرة التي تشفر التسلسل المستهدف، ثم يتم تجميع قالب gRNA مع محفز T7 في تفاعل PCR قصير "في وعاء واحد". بعد ذلك، يُستخدم الناتج المُجمّع كقالب في تفاعل النسخ المختبري (IVT)، يليه خطوة تنقية سريعة، مما ينتج عنه gRNA جاهز للنقل في غضون أربع ساعات فقط. يمكن أيضًا نقل الحمض النووي الريبوزي الموجه (gRNA) الناتج مع الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) الجاهز للنقل من نوع نوكلياز كريسبر من إنفيتوجين™. لا تتطلب كلتا صيغتي بروتين وmRNA Cas9 أي تعديل على البلازميد، وبالتالي فهما مناسبتان لأساليب الهندسة الخلوية عالية الإنتاجية والمتعددة على مستوى الجينوم.
تشمل مميزات مجموعة Precision gRNA Synthesis Kit ما يلي: تجميع وتخليق سريع لأي هدف gRNA في غضون أربع ساعات فقط، بما في ذلك تجميع القالب؛ إنتاجية عالية (>10 ميكروغرام) وتركيز عالٍ (>200 نانوغرام/ميكرولتر) من gRNA. كيفية الحصول على تسلسل gRNA: يتطلب تحرير الجينوم بتقنية CRISPR وجود RNA مرشد غير مشفر (gRNA) لقطع الحمض النووي الجينومي عند تسلسل الهدف المطلوب. يتكون gRNA من مكونين جزيئيين: RNA CRISPR خاص بالهدف (crRNA) وRNA crRNA منشط (tracrRNA)، وقد تم دمجهما في نسخة واحدة. يجب أن يكون تسلسل الهدف (20 قاعدة) مباشرةً قبل وحدة PAM (NGG) التي تسمح لإنزيم Cas9 ببدء الارتباط. توجد وحدة PAM فقط على الحمض النووي المستهدف وليست جزءًا من تسلسل CRISPR الخاص بالهدف. يقوم gRNA و PAM بتوجيه نوكلياز Cas9 إلى التسلسل الجينومي المستهدف لتشكيل مركب وإنشاء كسر DNA مزدوج السلسلة (DSB) على بعد ثلاثة نيوكليوتيدات من موقع PAM.
استخدم أداة البحث والتصميم الخاصة بنا لتقنية كريسبر للبحث في قاعدة بياناتنا التي تضم أكثر من 600,000 تسلسل gRNA مُخصص لكل جين في جينوم الإنسان والفأر. تم تصميم gRNAs مسبقًا من Invitrogen خصيصًا لتعطيل الجينات، وتستهدف عادةً أول ثلاثة إكسونات مُستنسخة لكل جين. تتضمن نتائج البحث توصيات مبنية على تقليل التأثيرات الجانبية المحتملة، ومواقع الارتباط المحتملة، وخرائط الإكسونات مع مواقع gRNA. يمكن أيضًا استخدام هذه الأداة لتحليل أي تسلسل ذي أهمية لتصميم تسلسلات كريسبر فريدة.
كيفية تحضير الحمض النووي الريبوزي الموجه (gRNA): بعد اختيار تسلسلات gRNA، اختر من بين ثلاثة خيارات لتحضيره: الحمض النووي الريبوزي الموجه الاصطناعي TrueGuide - اختر من كتالوجنا للحمض النووي الريبوزي الموجه المصمم مسبقًا أو حمّل تسلسلك إلى أداة طلب الحمض النووي الريبوزي الموجه TrueGuide. مجموعة تركيب الحمض النووي الريبوزي الموجه الدقيق (هذه الصفحة) - لتحضير حمض نووي ريبوزي موجه جاهز للنقل في غضون أربع ساعات فقط، بما في ذلك تجميع القالب. خدمات هندسة الجينوم - وفّر الوقت والجهد، ودع فريق خدماتنا المخصصة يصمم ويصنع وينقي تسلسلات الحمض النووي الريبوزي الموجه المنسوخة في المختبر (IVT) نيابةً عنك. للحصول على عرض أسعار للخدمات، أو لتقديم طلب، يُرجى الاتصال بقسم الخدمات المخصصة لدينا على الرقم 1-800-955-6288 تحويلة 45682 أو عبر البريد الإلكتروني gemservices@thermofisher.
com.
التركيز: 200 نانوغرام/ميكرولتر
نوع المنتج النهائي: الحمض النووي الريبي (RNA)
التنسيق: مجموعة
عدد التفاعلات: 25 تفاعلاً
نوع المنتج: مجموعة تركيب الحمض النووي الريبوزي الموجه (gRNA)
الجهة المنظمة: T7
الكمية: 25 تفاعلاً
شروط الشحن: يُسمح بالشحن في درجة حرارة الغرفة أو على ثلج رطب أو جاف
المادة الأولية: قليل النوكليوتيدات (الحمض النووي)
يكفي لـ: 25 تفاعلاً
التقنية: كريسبر-كاس9
العائد:> 10 ميكروغرام عند> 200 نانوغرام/ميكروليتر من gRNA
الشكل: سائل
سرعة رد الفعل: سريعة
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924