Thermo Fisher، A39260، كاشف نقل ملصق البيوتين Sulfo-SBED، بتنسيق No-Weigh™

Thermo Fisher, A39260, Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format The Thermo Scientific Pierce Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent is a multifunctional reagent for tag a purified protein and then transfer to an attachmenting the biotin tag into specific interactors of that protein.
Sulfo-SBED هو اختصار لـ Sulfo-N-hydroxysuccinimidyl-2-(6-[biotinamido]-2-(p-azido benzamido)-hexanoamido) ethyl-1,3'-dithiopropionate. وهو رابط كيميائي ثنائي الوظيفة غير متجانس، قادر على الارتباط تساهميًا بالأمينات الأولية من جهة، وبأي مجموعة وظيفية بروتينية تقريبًا من الجهة الأخرى. على عكس الروابط المتشابكة التقليدية، يحتوي Sulfo-SBED أيضًا على مجموعة بيوتين وذراع فاصل ثنائي الكبريتيد قابل للكسر. تسمح هذه الميزات مجتمعةً بربط البروتينات المتفاعلة بشكل متسلسل ونقل علامة تقارب البيوتين من بروتين إلى آخر (مثلًا، بروتين واحد).
أي، بروتين "طُعم" مُنقّى إلى بروتين "فريسة" آخر (ربما غير معروف). يُعدّ نقل العلامات طريقةً فعّالةً في المختبر لاكتشاف تفاعلات البروتينات. ويُبرز عددٌ متزايدٌ من المنشورات استخدام كاشف نقل علامات البيوتين Sulfo-SBED لتحديد شركاء ارتباط تفاعلات البروتينات غير المعروفين سابقًا، ولتوصيف نطاقات ارتباط البروتينات المحددة لتفاعلات البروتينات الأخرى بشكلٍ أكثر شمولًا.
البروتوكول النموذجي لتجربة نقل العلامات:
• أضف بضعة ميكرولترات من كاشف Sulfo-SBED المذاب إلى 0.
5-1 مل من بروتين الطعم المنقى في محلول ملحي فوسفاتي.
• حضّن الخليط لمدة 30-120 دقيقة على الجليد أو في درجة حرارة الغرفة في الظلام.
• قم بإزالة الأملاح أو الغسيل الكلوي (في ضوء خافت) لإزالة فائض Sulfo-SBED غير المتفاعل من بروتين الطعم الموسوم.
• أضف بروتين الطعم الموسوم إلى مستخلص الخلية أو محلول آخر يحتوي على بروتينات متفاعلة مستهدفة محتملة ("الفريسة").
• عند تكوين المركبات التفاعلية، قم بتعريض المحلول للأشعة فوق البنفسجية (365 نانومتر) لعدة دقائق.
• تحليل المنتجات بإحدى الطرق التالية:
•التلطيخ الغربي: قم بفصل الروابط المتشابكة في DTT، وافصل البروتينات بواسطة SDS-PAGE، واكتشف الحزم المبيوتينية بواسطة التلطيخ الغربي باستخدام ستربتأفيدين-HRP.
•التنقية والتحليل الطيفي الكتلي أو التسلسل: تنقية البروتينات أو أجزاء الببتيدات المرتبطة بالبيوتين بعد الهضم بالتربسين وإجراء التحليل الطيفي الكتلي أو التسلسل لتوصيف البروتينات المعنية.
التفاعل الكيميائي: من أمين إلى أمين
طريقة وضع العلامات: وضع العلامات الكيميائية، نقل العلامات
العلامة أو الصبغة: البيوتين
نوع المنتج: كاشف نقل ملصق البيوتين سلفو-إس بي إي دي
الكمية: 10 × 1 ملغ
الجزء التفاعلي: إستر NHS، ألكاين
شروط الشحن: مؤهل للاستخدام مع الثلج العادي أو الثلج الرطب
الذوبانية: ثنائي ميثيل فورماميد (DMF)، ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO)، ميثانول، ماء
نوع الملصق: البيوتين والهابتينات الأخرى
خط الإنتاج: بيرس™
حجم الوحدة: كل وحدة