Thermo Fisher، AM1340، مجموعة النسخ mMESSAGE mMACHINE™ SP6

مجموعة mMESSAGE mMACHINE™ SP6 للنسخ: صُممت مجموعات mMESSAGE mMACHINE™ لتخليق كميات كبيرة من الحمض النووي الريبوزي المُغطى (capped RNA) في المختبر. يُحاكي الحمض النووي الريبوزي المُغطى معظم أنواع الحمض النووي الريبوزي الرسول (mRNA) حقيقية النواة الموجودة في الجسم الحي، وذلك لاحتوائه على بنية غطاء 7-ميثيل غوانوزين في الطرف 5'. تتضمن تفاعلات مجموعة mMESSAGE mMACHINE™ استخدام نظير الغطاء [m7G(5')ppp(5')G] في تفاعل نسخ عالي الإنتاجية. يُدمج نظير الغطاء فقط كأول غوانوزين (G) أو الطرف 5' من النسخة، لأن بنيته تمنع دمجه في أي موضع آخر في جزيء الحمض النووي الريبوزي. آلية عمل مجموعات mMESSAGE mMACHINE™: تتميز مجموعات mMESSAGE mMACHINE™ بصيغة تفاعل مُبسطة، حيث تُخلط جميع النيوكليوتيدات الريبوزية الأربعة ونظير الغطاء في محلول واحد. نسبة نظير الغطاء إلى GTP في هذا المحلول هي 4:1، وهي النسبة المثلى لزيادة كل من كمية الحمض النووي الريبوزي (RNA) ونسبة النسخ المغطاة. تُعدّ مجموعات mMESSAGE mMACHINE™ مثالية للتخليق الروتيني للحمض النووي الريبوزي المغطى (capped RNA) لحقن البويضات المجهري، والترجمة في المختبر، والنقل الجيني، وغيرها من التطبيقات. يتم تحقيق هذه الكميات العالية من خلال تحسين ظروف التفاعل لتخليق الحمض النووي الريبوزي في وجود تركيزات عالية من النيوكليوتيدات. بالإضافة إلى ذلك، تتم حماية الحمض النووي الريبوزي المُصنّع من التحلل بواسطة أي إنزيمات ريبونوكلياز ملوثة قد تكون موجودة، وذلك بفضل مثبط الريبونوكلياز - وهو أحد مكونات مزيج الإنزيم. باستخدام مجموعات mMESSAGE mMACHINE™، في تفاعل حجمه 20 ميكرولتر خلال فترة حضانة مدتها ساعتان، تُنتج مجموعة mMESSAGE mMACHINE™ High Yield Capped RNA Transcription كميات كبيرة من الحمض النووي الريبوزي المغطى، تصل إلى 10-50 ضعف الكمية التي يتم الحصول عليها باستخدام تفاعلات النسخ التقليدية في المختبر. تم تحسين نسبة نظير الغطاء إلى GTP لتحقيق أفضل توازن بين كمية الحمض النووي الريبوزي المُغطى (15-35 ميكروغرام) ونسبة النسخ المُغطاة (80%). تحتوي مجموعات mMESSAGE mMACHINE™ أيضًا على محلول ترسيب LiCl فعال لفصل البروتينات والنيوكليوتيدات غير المُدمجة (بما في ذلك نظير الغطاء الحر) عن الحمض النووي الريبوزي المُغطى، مما يُحسّن كفاءة الترجمة. صُممت مجموعات mMESSAGE mMACHINE™ خصيصًا للاستخدام مع البوليميرازات المُضمنة في المجموعة. قد يؤدي استخدام بوليميراز مختلف إلى انخفاض كمية الحمض النووي الريبوزي المُغطى. تحتوي مجموعات mMESSAGE mMACHINE™ على جميع المحاليل المنظمة والكواشف اللازمة لـ 25 تفاعل نسخ. باستخدام قالب التحكم المرفق مع المجموعة (عامل استطالة زينوبوس 1α، pTRI Xef)، ينتج كل تفاعل mMESSAGE mMACHINE™ ما يقارب 20-30 ميكروغرام من الحمض النووي الريبي (RNA) باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي T3 أو T7، أو حوالي 15-25 ميكروغرام من الحمض النووي الريبي باستخدام بوليميراز الحمض النووي الريبي SP6. للاستخدام مع (التطبيق): النسخ في المختبر، الحمض النووي الريبي الرسول الاصطناعي، الحمض النووي الريبي الرسول، النقل الجيني، جسيمات نانوية دهنية، GENEart، بلازميد الحمض النووي الخطي، التوصيل، منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR).
عدد التفاعلات: 25 تفاعلاً
خط الإنتاج: Ambion™، mMESSAGE mMACHINE™
نوع المنتج: مجموعة النسخ المختبري SP6
الجهة المنظمة: SP6
الكمية: 25 تفاعلاً
شروط الشحن: ثلج جاف
المواد الأولية: منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل، بلازميد الحمض النووي الخطي
الناتج: 15-25 ميكروغرام
نوع المنتج النهائي: mRNA اصطناعي، mRNA
التنسيق: مجموعة
نوع العينة: mRNA، mRNA اصطناعي
حجم الوحدة: كل وحدة