Thermo Fisher، C10635، Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 647 Flow Cytometry Assay Kit، 100 تفاعل

مجموعة اختبار قياس التدفق الخلوي Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 647، 100 تفاعل. توفر مجموعة اختبار قياس التدفق الخلوي Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 طريقةً مبسطةً وأكثر دقةً لتحليل تضاعف الحمض النووي في الخلايا المتكاثرة مقارنةً بطرق BrdU التقليدية. يتم تحليل الحمض النووي المُصنّع حديثًا باستخدام ليزر 647 نانومتر الخاص بجهاز قياس التدفق الخلوي. تركيبة Click-iT® Plus متوافقة مع الفلوروفورات القياسية، بما في ذلك R-PE وR-PE المزدوج، بالإضافة إلى البروتينات الفلورية.
• قابل للتعدد - متوافق مع R-PE (والثنائيات) والبروتينات الفلورية
• دقيق - نتائج فائقة مقارنة باختبارات BrdU
• سريع - تظهر النتائج في غضون 60 دقيقة فقط. اطلع على دليل الاختيار لجميع فحوصات Click-iT™ EdU و Click-iT™ Plus EdU لقياس التدفق الخلوي. قابلية التعدد: توفر تركيبة Click-iT® Plus إمكانية تعدد أعلى مقارنةً بفحوصات Click-iT® EdU الأصلية لقياس التدفق الخلوي. يمكن استخدام فحوصات Click-iT® Plus EdU مع R-PE و R-PE tandems، بالإضافة إلى البروتينات الفلورية مثل GFP و mCherry، دون فقدان دقة أو سرعة فحص Click-iT® EdU الأصلي. طريقة متطورة تمنحك نتائج أفضل من BrdU: الطريقة الأكثر دقة لتحليل التكاثر هي القياس المباشر لتخليق الحمض النووي. في الأصل، كان يتم ذلك من خلال دمج النيوكليوسيدات المشعة. تم استبدال هذه الطريقة بالكشف القائم على الأجسام المضادة عن نظير النيوكليوسيد بروموديوكسي يوريدين (BrdU). يُعد فحص Click-iT® Plus EdU لقياس التدفق الخلوي بديلاً مبتكرًا لفحص BrdU. يُعدّ EdU (5-إيثينيل-2'-ديوكسي يوريدين) نظيرًا للثيميدين يُدمج في الحمض النووي DNA أثناء عملية تخليق الحمض النووي النشطة. يعتمد الكشف عنه على تفاعل كيميائي انتقائي، وهو تفاعل تساهمي محفز بالنحاس بين مجموعة أزيد ومجموعة ألكاين. في هذا التطبيق، توجد مجموعة الألكاين في جزء الإيثينيل من EdU، بينما ترتبط مجموعة الأزيد بصبغة Alexa Fluor®. تُستخدم طرق قياس التدفق الخلوي القياسية لتحديد نسبة خلايا الطور S في العينة. تسمح الظروف المعتدلة باستخدامه مع أصباغ دورة الخلية والأجسام المضادة. يسمح الحجم الصغير لصبغة الأزيد بالكشف الفعال عن EdU المدمج باستخدام ظروف معتدلة، بينما يكفي التثبيت القياسي القائم على الألدهيد ونفاذية المنظفات لكي يصل كاشف Click-iT® Plus إلى الحمض النووي DNA. يختلف هذا عن فحوصات BrdU التي تتطلب تمسخ الحمض النووي (باستخدام حمض الهيدروكلوريك أو الحرارة أو الهضم بواسطة إنزيم DNase) لكشف BrdU حتى يمكن الكشف عنه باستخدام جسم مضاد لـ BrdU. قد تؤدي معالجة العينة لفحص BrdU إلى تغيير إشارة توزيع دورة الخلية، بالإضافة إلى تدمير مواقع التعرف على المستضد عند استخدام طريقة حمض الهيدروكلوريك. في المقابل، يتوافق فحص Click-iT® Plus EdU سهل الاستخدام مع أصباغ دورة الخلية. كما يمكن إجراء فحص Click-iT® Plus EdU باستخدام أجسام مضادة ضد علامات سطحية وداخل خلوية، بالإضافة إلى مركبات مُقترنة مُوسومة بفلوروفورات قياسية بما في ذلك R-PE، وR-PE المزدوج، والبروتينات الفلورية (GFP وmCherry). بروتوكول سريع وبسيط: يعتمد بروتوكول Click-iT® Plus EdU على خطوات تثبيت الألدهيد ونفاذية المنظفات لوسم الأجسام المضادة المناعية النسيجية. مع ذلك، يتوافق EdU مع عوامل التثبيت/النفاذية الأخرى، بما في ذلك الصابونين والميثانول. في خمس خطوات فقط، ستكون جاهزًا لتحليل بيانات تكاثر الخلايا: 1. عالج الخلايا بـ EdU. 2. ثبّت الخلايا واجعلها نفاذة. 3. اكشف عن خلايا طور S باستخدام محلول الكشف Click-iT® Plus لمدة 30 دقيقة. 4. اغسل مرة واحدة. 5. حلل. قد تظهر النتائج في غضون 60 دقيقة في بعض الحالات، ولكننا نوصي بـ 90 دقيقة لجميع التطبيقات. طريقة الكشف: التألق.
الإثارة/الانبعاث: 650/670
التنسيق: أنبوب (أنابيب)
العلامة أو الصبغة: أليكسا فلور™ 647
خط الإنتاج: كليك-آي تي™
الكمية: 100 اختبار
شروط الشحن: درجة حرارة الغرفة
للاستخدام مع (المعدات): جهاز قياس التدفق الخلوي
نوع المنتج: مجموعة اختبار
حجم الوحدة: كل وحدة