خلايا Thermo Fisher، C739601، MultiShot™ StripWell Stbl3™ المؤهلة

خلايا MultiShot™ StripWell Stbl3™ المؤهلة كيميائيًا: خلايا E. colicells هي خلايا مؤهلة للاستنساخ مصممة لاستنساخ التكرارات المباشرة الموجودة في نواقل التعبير الفيروسية البطيئة. تقلل خلايا Stbl3 من معدل إعادة التركيب المتماثل، وهي مُقسّمة مسبقًا في حامل يحتوي على 12 شريطًا من 8 آبار لزيادة الإنتاجية في عمليات التحويل البكتيري عالية الإنتاجية.
تحقيق استقرار ملحوظ لناقلات الفيروسات البطيئة في خلايا Stbl3. تعمل خلايا Stbl3 المؤهلة متعددة الطلقات على تقليل تواتر إعادة التركيب المتماثل للتكرارات المباشرة الموجودة في ناقلات الفيروسات البطيئة (على سبيل المثال).
(على سبيل المثال، مجموعات التعبير الفيروسي البطيء ViraPower) وغيرها من النواقل الفيروسية الرجعية (مثل
(على سبيل المثال، البلازميدات القائمة على فيروس نقص المناعة البشرية المعرضة لعدم الاستقرار). وقد تم استخدام سلالة Stbl3 في العديد من التطبيقات، بما في ذلك عمليات تحرير الجينوم باستخدام تقنية CRISPR، وتطوير اللقاحات، واستنساخ وصيانة النواقل ذات التكرارات المتعددة (على سبيل المثال).
(على سبيل المثال، جين يشفر بروتينًا بتسلسل متكرر). تبلغ كفاءة تحويل خلايا الإشريكية القولونية المؤهلة كيميائيًا باستخدام MultiShot StripWell Stbl3 أكثر من 1 × 107 وحدة تشكيل مستعمرة/ميكروغرام من الحمض النووي البلازميدي.
سلالة Stbl3E. coli مشتقة من سلالة HB101 (ذات جينوم هجين من سلالتي K-12 وB). على الرغم من احتواء سلالة Stbl3 على الأليل rcA13 لطفرة rcA التي تقلل من حدوث إعادة التركيب غير النوعي في الحمض النووي المستنسخ، إلا أن قدرة سلالة Stbl3 على الحفاظ على الإدخالات غير المستقرة تُعزى، بحسب التقارير، إلى سمات وراثية أخرى. تسمح الطفرات في نظام التقييد المعتمد على مثيلة Stbl3 (mcrB وmrr وhsdS20) ببناء الحمض النووي الجينومي المستنسخ. هذه السلالة هي endA1+، وبالتالي يوجد في خلاياها إنزيم نوكلياز داخلي غير نوعي من النوع الأول يهضم الحمض النووي. تنتج سلالة Stbl3، بشكل متكرر، كمية أكبر بكثير من الحمض النووي البلازميدي مقارنةً بسلالات DH (مثلًا،
على سبيل المثال، 10 أضعاف أو أكثر من الحمض النووي البلازميدي مقارنة بسلالة TOP10) وينتج بشكل مستدام فيروسات lentivirus عالية العيار.
توفر خلايا MultiShot StripWell Stbl3 Competent ما يلي:
• الكفاءة المتوقعة >1 × 107 متحول/ميكروغرام من الحمض النووي البلازميدي
• الأداء الأمثل لتكاثر النواقل الفيروسية البطيئة والحفاظ على التكرارات المباشرة
• تحسين قدرة استنساخ الحمض النووي الجينومي (mcrB، mrr، وhsdS20)
• القدرة على إنتاج كميات كبيرة من الحمض النووي. ملاحظة: للحصول على أفضل أداء في الحفاظ على البلازميدات ذات التسلسلات المتكررة المعقدة، يجب زراعة خلايا Stbl3 عند درجة حرارة 30 درجة مئوية. عند إجراء عزل الحمض النووي للبلازميد من خلايا Stbl3 باستخدام الإندونوكلياز I من النوع البري (endA1+)، تأكد من احتواء المحاليل المنظمة على 10 ملي مولار من EDTA. يعمل EDTA على تعطيل الإندونوكلياز ويمنع حدوث أي قطع في الحمض النووي وتدهور الناقل (اتبع تعليمات مجموعة تنقية الحمض النووي للبلازميد لسلالات الإشريكية القولونية endA1+).
تنسيق MultiShot StripWell المرن: صُمم كل شريط StripWell، المكون من ثمانية أنابيب متصلة، بنفس خصائص الاستخدام لمرة واحدة التي تتميز بها أنابيب One Shot. يتيح هذا التنسيق إجراء جميع خطوات بروتوكول التحويل، وصولاً إلى الزرع، في نفس الأنبوب، مما يوفر الوقت ويقلل من احتمالية التلوث. بعد إضافة الحمض النووي، يمكن تحويل الخلايا المؤهلة في MultiShot StripWell عن طريق الصدمة الحرارية عند 42 درجة مئوية باستخدام حمام مائي، كل ذلك في نفس الأنبوب.
يمكن قطع أنابيب StripWell للسماح بالتحولات في أنبوب واحد، مما يؤدي إلى التخلص من الكميات المهدرة وتجنب دورات التجميد والذوبان التي يمكن أن تؤدي إلى انخفاض كفاءة التحويل.
تشمل مزايا تنسيق MultiShot StripWell ما يلي:
• زيادة الإنتاجية - مناسبة للتجارب ذات الإنتاجية العالية
• أقصى قدر من المرونة - تحويل ما لا يقل عن أنبوب واحد أو ما يصل إلى 96 أنبوبًا من رف StripWell
•سهولة مألوفة - أضف الحمض النووي مباشرة إلى الخلايا، وقم بالصدمة الحرارية، واسترجعه في نفس الأنبوب. النمط الجيني F–mcrBmrr hsdS20(rB–, mB–)recA13supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(StrR)xyl-5 λ–leu mtl-1 ابحث عن السلالة والشكل الذي تحتاجه. تتوفر سلالات Stbl أخرى بخلفية جينية مختلفة.
تتوفر أيضًا العديد من سلالات وأنواع الخلايا الأخرى ذات الكفاءة الكيميائية والكهربائية لتلبية احتياجات التحويل المحددة.
لتحويل البيانات بسرعة عالية، اختر من مجموعتنا من خلايا المقارنة المنسقة بتقنية MultiShot، أو راسلنا عبر البريد الإلكتروني للحصول على خيارات تنسيق مخصصة.
نقدم أوساط نمو البكتيريا بأشكال متنوعة.
مقاومة البكتيريا للمضادات الحيوية: نعم (ستربتومايسين)
عرض باللونين الأزرق والأبيض: لا
استنساخ الحمض النووي الميثيلي: نعم (mcrB، mrr)
استنساخ الحمض النووي غير المستقر: نعم (recA13)
لا يحتوي على F' Episome: لا
التوافق مع الإنتاجية العالية: عالي
البلازميد: يمكن استخدامه للبلازميدات التي يزيد حجمها عن 20 كيلوبايت
تحضير الحمض النووي غير الميثيلي: لا
خط الإنتاج: Multishot™
نوع المنتج: خلايا مؤهلة كيميائياً
الكمية: 1 × حامل أنابيب 96 (50 ميكرولتر/أنبوب)
يقلل من إعادة التركيب: نعم (recA13)
شروط الشحن: ثلج جاف
مقاومة العاثية T1 (tonA): لا
التنسيق: شرائط ذات 8 خانات
النوع: الإشريكية القولونية (هجين K12/B)
حجم الوحدة: كل وحدة