Thermo Fisher، K102002، مجموعة T-REx™ الأساسية، مع ناقل pcDNA™4/TO

مجموعة T-REx™ الأساسية، مع ناقل pcDNA™4/TO، نظام تعبير مُنظَّم بالتتراسيكلين بدون مُنشِّطات نسخ فيروسية. يُنتج نظام T-REx™ مستويات أعلى من التعبير المُحفَّز مقارنةً بأي نظام تعبير مُنظَّم آخر في الثدييات. يستخدم مُحفِّز CMV الكامل، ويُضيف عناصر تحكُّم من أوبيرون مقاومة التتراسيكلين البكتيري لكبح وتنشيط النسخ بفعالية من أحد أقوى تسلسلات مُحفِّزات الثدييات المعروفة (1،2).
التنشيط النوعي: يستخدم نظام T-REx™ آلية كبح تمنع النسخ من مُحفِّز CMV القوي في غياب التتراسيكلين. ولأن عناصر نظام T-REx™ لا تستخدم مُنشِّطات النسخ الفيروسية، يُمكنك تحقيق تعبير عالي المستوى من مُحفِّز CMV الكامل دون تنشيط ثانوي غير نوعي لجينات المضيف.
آلية T-REx™: يوضح الشكل 1 عناصر التحكم النسخي لآلية T-REx™. تم إدخال سلسلتين من مُشغِّل التتراسيكلين (TetO2) بين صندوق TATA الخاص بمُحفِّز CMV وموقع بدء النسخ. لا تؤثر سلسلة TetO2 بحد ذاتها على التعبير الجيني. عند وجود بروتين كابح التتراسيكلين (TR)، فإنه يرتبط بفعالية بمواقع TetO2 ويمنع بدء النسخ. يرتبط التتراسيكلين المُضاف إلى وسط الاستنبات ببروتين TR ويُغير بنيته. يؤدي هذا التغيير إلى تحرير بروتين TR من مواقع TetO2، مما يُزيل تثبيط النسخ من مُحفِّز CMV. والنتيجة هي تعبير عالي المستوى للجين المستهدف (الشكل 2). يمكن تعديل مستويات التعبير بناءً على تركيز التتراسيكلين، ويمكن تحفيزها إلى مستويات مماثلة لتلك التي يتم تحقيقها باستخدام نواقل التعبير التكويني لـ CMV.
يُعدّ T-REx™ نظامًا قويًا للتعبير الجيني في الخلايا الثديية، قابلًا للتحفيز، يسمح لك بتنظيم التعبير الجيني انطلاقًا من مُحسِّن ومُحفِّز فيروس CMV البشري الكامل. توفر نواقل التعبير الجيني القابلة للتحفيز T-REx™ الميزات التالية:
• تسلسل مُحسِّن-مُحفِّز كامل لفيروس CMV يحتوي على نسختين من مُشغِّل التتراسيكلين TetO2sequence للتعبير المُنظَّم عالي المستوى
• جين مقاومة الزيوسين™ أو الهيجروميسين للاختيار الفعال لسلالات الخلايا الثديية المستقرة
• موقع استنساخ متعدد كبير لتبسيط عملية الاستنساخ بالإضافة إلى ذلك، يوفر pcDNA™4/TO/myc-His ac-mycepitope للكشف السريع عن البروتين المؤتلف باستخدام جسم مضاد لـ myc وتسلسل متعدد الهيستيدين (6xHis) لتنقية بسيطة للبروتين المؤتلف باستخدام راتنج مخلب النيكل والكشف باستخدام جسم مضاد لـ His (الطرف C).
يُستخدم الناقل التنظيمي pcDNA™6/TR للتعبير عالي المستوى عن بروتين مثبط التتراسيكلين (TR). يُعبّر هذا الناقل عن جين مقاومة البلاستيسيدين لاختيار سريع لسلالات الخلايا الثديية التي تُعبّر بشكل مستقر عن بروتين TR.
النظام التكويني أو النظام القابل للتحريض: قابل للتحريض
نوع التوصيل: نقل الجينات
للاستخدام مع (التطبيق): التعبير المنظم
العامل المحفز: التتراسيكلين
نوع المنتج: مجموعة استنساخ نواة الديناصور ريكس مع ناقل
الكمية: طقم واحد
عامل الانتقاء (حقيقيات النوى): زيوسين™، بلاستيسيدين
الناقل: pcDNA
طريقة الاستنساخ: إنزيم التقييد/MCS
خط الإنتاج: Gateway™، T-REx™، pcDNA™
الجهة المنظمة: CMV/TO
علامة البروتين: غير موسومة
حجم الوحدة: كل وحدة