Product Description
مجموعة استنساخ الحمض النووي بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) من Thermo Scientific CloneJET، المتوفرة أيضًا مع خلايا DH10B (K123120)، هي نظام متطور للاختيار الإيجابي لاستنساخ منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بكفاءة عالية باستخدام أي بوليميراز DNA مقاوم للحرارة. يمكن استنساخ أي قطعة DNA ذات نهايات لاصقة أو غير لاصقة. وهي مثالية لقطع DNA المفسفرة وغير المفسفرة. يستغرق ربطها بناقل الاختيار الإيجابي المرفق 5 دقائق فقط، مما ينتج عنه أكثر من 99% من المستنسخات المؤتلفة. يتم ربط منتجات PCR ذات النهايات غير اللاصقة، المُنتجة باستخدام إنزيم التدقيق، مباشرةً بناقل الاستنساخ. أما منتجات PCR المُنتجة باستخدام بوليميراز DNA غير المدقق أو مخاليط من بوليميراز DNA، فتُزال نهاياتها قبل الربط في غضون 5 دقائق باستخدام إنزيم إزالة النهايات اللاصقة المقاوم للحرارة المرفق مع المجموعة. يمكن تحويل جميع سلالات الإشريكية القولونية (E. coli) الشائعة في المختبرات مباشرةً باستخدام ناتج الربط. الميزات: تحتوي مجموعة CloneJET PCR Cloning Kit على ناقل استنساخ جديد وجاهز للاستخدام، وهو pJET1.2/blunt، يتميز بانتقاء إيجابي. يحتوي هذا الناقل على جين إنزيم تقييد قاتل يتم تعطيله عن طريق ربط قطعة DNA مُدرجة في موقع الاستنساخ. ونتيجة لذلك، فإن الخلايا البكتيرية الحاملة للبلازميدات المُعاد تركيبها فقط هي القادرة على تكوين مستعمرات. أما جزيئات ناقل pJET1.2/blunt المُعاد تدويرها، والتي تفتقر إلى القطعة المُدرجة، فتُعبّر عن إنزيم تقييد قاتل، مما يؤدي إلى موت خلية E. coli المُضيفة بعد التحويل. يُسرّع هذا الانتقاء الإيجابي عملية فحص المستعمرات بشكل كبير، ويُلغي التكاليف الإضافية اللازمة للاختيار الأزرق/الأبيض. ولتسهيل عملية تحديد موقع القطعة المُدرجة ومعالجتها، يحتوي ناقل الاستنساخ pJET1.2/blunt على موقعي استنساخ مُتعددين للتعرف على BglII يُحيطان بموقع الإدخال. بالإضافة إلى ذلك، يحتوي الناقل على مُحفز T7 للنسخ في المختبر وفي الخلايا الحية، وكذلك لتسلسل القطعة المُدرجة. أبرز النقاط
• سريع - استنساخ تفاعل البوليميراز المتسلسل في 5 دقائق فقط
• أعلى كفاءة - أكثر من 99% من المستنسخات الإيجابية
• لا يوجد خلفية للاستنساخ - ناقل اختيار إيجابي
• متعدد الاستخدامات - مثالي للاستنساخ ذي النهايات غير الحادة أو ذات النهايات اللاصقة
• اقتصادي - لا يتطلب استخدام شاشات زرقاء/بيضاء باهظة الثمن.
• استنساخ منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل ذات النهايات غير المتداخلة أو ذات الذيل 3'-dA حتى 10 كيلوبايت
• استنساخ أجزاء الحمض النووي الناتجة عن إنزيمات التقييد
• تسلسل الحمض النووي المستنسخ
• نسخ الجينات المستنسخة من محفز T7 في المختبر وفي الجسم الحي.
• ناقل الاستنساخ pJET1.2/blunt
• إنزيم ربط الحمض النووي T4
• محلول التفاعل 2X
• إنزيم تلطيف الحمض النووي
• pJET1.2 بادئ التسلسل الأمامي (5'-CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3')
• pJET1.2 بادئ التسلسل العكسي (5'-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3')
• التحكم في منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)
•ماء، خالٍ من النيوكلياز
• بروتوكول مفصل: قبل إجراء عملية التثقيب الكهربائي، يجب دائمًا تنقية خليط الربط باستخدام عمود تنقية، على سبيل المثال باستخدام مجموعة GeneJET PCR Purification Kit رقم K0701 أو الكلوروفورم لاستخلاصه. يُثبط وجود البروتينات والأملاح في الخليط عملية التثقيب الكهربائي. مقاومة المضادات الحيوية: البكتيريا: أمبيسيلين (AmpR)
طريقة الاستنساخ: إنزيم التقييد/ MCS، تفاعل البوليميراز المتسلسل غير المتداخل
للاستخدام مع (التطبيق): استنساخ PCR
عدد التفاعلات: 40 تفاعلاً
خط الإنتاج: كلون جيت
نوع المنتج: طقم استنساخ
الكمية: 40 تفاعلاً
نوع العينة: منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)
Vector: pJET1.2/blunt
التنسيق: مجموعة
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924