Thermo Fisher, K1271, aLICator LIC Cloning and Expression Set 1 (All-in-One/EK)

مجموعة aLICator LIC للاستنساخ والتعبير الجيني 1 (الكل في واحد/EK) من Thermo Scientific. صُمم نظام aLICator™ LIC للاستنساخ والتعبير الجيني من Thermo Scientific للاستنساخ السريع والفعال غير المعتمد على الربط، مع تنظيم دقيق للتعبير الجيني في بكتيريا الإشريكية القولونية. صُممت نواقل التعبير البكتيرية pLATE لإنتاج مستويات عالية من البروتين المستهدف مع الحد الأدنى من التعبير الخلفي (غير المُحفز)، مما يسمح بإنتاج البروتينات السامة لخلايا الإشريكية القولونية. ولتبسيط عملية إدخال الاستنساخ في ناقل التعبير، يستخدم نظام aLICator تقنية الاستنساخ الاتجاهي LIC، وهي إجراء سريع يوفر كفاءة عالية في الاستنساخ. بفضل تنظيم التعبير الدقيق والاستنساخ الاتجاهي السريع والفعال، يُعد نظام aLICator LIC للاستنساخ والتعبير الجيني الخيار الأمثل للاستنساخ والتعبير الجيني الروتيني والسام في بكتيريا الإشريكية القولونية.
• استنساخ LIC عالي الكفاءة
• التحكم الدقيق في التعبير الجيني
• تعبير عالي الإنتاجية
• متعدد الاستخدامات - التعبير عن البروتينات الموسومة أو غير الموسومة مع خيار إزالة الوسم.
• استنساخ منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل الموجه
• تنظيم دقيق للتعبير البروتيني
• التعبير عن الجينات السامة: مبدأ عمل نظام الاستنساخ aLICator LIC: يستخدم نظام الاستنساخ LIC الموجه تقنية الاستنساخ LIC لتبسيط عملية الاستنساخ في ناقل التعبير وتسهيلها. يضمن LIC كفاءة استنساخ عالية تتجاوز 95%، ويُغني عن الحاجة إلى خطوات الربط والهضم باستخدام إنزيمات التقييد. تعتمد طريقة LIC على بوليميراز الحمض النووي T4 لإنشاء نهايات أحادية السلسلة محددة، يتراوح طولها بين 14 و21 نيوكليوتيدًا، على نواقل pLATE وإدخالات الحمض النووي. يتميز بوليميراز الحمض النووي T4 بنشاطين إنزيميين: نشاط بوليميراز 5'→3' ونشاط إكسونوكلياز 3'→5'. يزيل نشاط الإكسونوكلياز النيوكليوتيدات من نهايات 3' للحمض النووي، بينما يعيد نشاط البوليميراز بناء السلسلة باستخدام dNTPs وسلسلة الحمض النووي المكملة كقالب. في بروتوكول LIC، يُستخدم dGTP فقط في التفاعل، مما يؤدي إلى توازن نشاطي الإكسونوكلياز 3'→5' والبوليميراز 5'→3' عند أول ظهور للسيتوزين في السلسلة المكملة. بعد التهجين، يتم تحويل ناقل LIC والقطعة المُدخلة إلى خلايا E. colicells المؤهلة دون استخدام إنزيم T4 DNA ligase. يتشكل رابط تساهمي عند نقاط اتصال الناقل والقطعة المُدخلة داخل الخلية لإنتاج بلازميد دائري. يتكون النظام من أربع مجموعات تعتمد على سلسلة pLATE من نواقل التعبير البكتيرية.
• مجموعة aLICator™ LIC للاستنساخ والتعبير 1- ناقل pLATE11، تعبير البروتين غير الموسوم.
•مجموعة الاستنساخ والتعبير aLICator™ LIC 2 (علامة الهيستيدين الطرفية N/EK)—ناقل pLATE51، تعبير بروتين علامة الهيستيدين الطرفية N.
•مجموعة aLICator™ LIC Cloning and Expression Kit 3 (C-terminal His-tag)—ناقل pLATE31، تعبير بروتين C-terminal His-tag.
•مجموعة الاستنساخ والتعبير aLICator™ LIC 4 (علامة His الطرفية N/WQ)—ناقل pLATE 52، تعبير بروتين علامة His الطرفية N، انقسام WELQut.
•مجموعة الاستنساخ والتعبير aLICator™ LIC 1 (الكل في واحد/EK) - ناقلات pLATE11 و pLATE51 و pLATE31، خيار التعبير عن البروتين غير الموسوم، أو بروتين His-tag الطرفي N أو C.
• مجموعة aLICator™ LIC للاستنساخ والتعبير 2 (الكل في واحد/WQ) - تتضمن نواقل pLATE11 وpLATE52 وpLATE31، مع إمكانية اختيار التعبير عن البروتين غير الموسوم، أو الموسوم بعلامة His في الطرف الأميني أو الكربوكسيلي، بالإضافة إلى عملية قطع WELQut. بالنسبة للبروتينات التي تُظهر تفضيلًا معروفًا لموقع علامة 6xHis في الطرف الأميني أو الكربوكسيلي، يُوصى باستخدام المجموعة المناسبة للطرف الأميني أو الكربوكسيلي. عندما لا تكون بنية البروتين وخصائصه معروفة جيدًا، يُوصى باستنساخه في النواقل الثلاثة جميعها وتحديد الناقل الأكثر توافقًا لإجراء المزيد من الأبحاث. مقاومة المضادات الحيوية للبكتيريا: أمبيسيلين (AmpR)
طريقة الاستنساخ: استنساخ LIC
للاستخدام مع (التطبيق): استنساخ PCR
عدد التفاعلات: 30 تفاعلاً
خط الإنتاج: أليكاتور
نوع المنتج: مجموعة استنساخ وتعبير LIC
الجهة المنظمة: T7
علامة البروتين: علامة الهيست (6x)
الكمية: 30 تفاعلاً
نوع العينة: منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)
متجه: لوحة
حجم الوحدة: كل وحدة