Product Description
مجموعة استنساخ pENTR™/SD/D-TOPO™، مع بكتيريا الإشريكية القولونية One Shot™ TOP10 المُؤهلة كيميائيًا. تستخدم مجموعات استنساخ pENTR™/SD/D-TOPO™ استراتيجية استنساخ عالية الكفاءة تستغرق 5 دقائق ("استنساخ TOPO™") لاستنساخ منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذي النهايات غير المتداخلة بشكل موجه في ناقل لإدخاله في نظام Gateway™ أو نظام MultiSite Gateway™. يتم استنساخ منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذات النهايات غير المتداخلة بشكل موجه في ناقل الإدخال pENTR™/SD/D-TOPO™ بكفاءة تزيد عن 90%، وتتضمن تسلسل Shine-Dalgarno في الاتجاه المعاكس للتعبير في بدائيات النوى. تحتوي المجموعة على كل ما يلزم لاستنساخ واختيار جين PCR المُضخّم الذي ترغب به.
• جاهز لنظام Gateway™ - ينقل الجينات المستنسخة بسرعة بين أنظمة ناقلات متعددة
• سريع وسهل - انتقل من تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) إلى استنساخ Gateway™ Entry في 3 خطوات فقط وفي غضون 5 دقائق فقط من العمل اليدوي
• فعال - يحقق أكثر من 90% من الاستنساخ مع الإدخال الصحيح في الاتجاه الصحيح
• أداء موثوق به ومثبت لأكثر من عقد من الزمان. نظرة عامة على مجموعات استنساخ pENTR™SD/D-TOPO™: ناقل pENTR™/SD/D-TOPO™: ناقل استنساخ اتجاهي للدخول إلى نظام Gateway™ ومُحسَّن للتعبير في بدائيات النوى. طريقة الاستنساخ: استنساخ TOPO™ الاتجاهي: ربط اتجاهي يعتمد على إنزيم توبويزوميراز I لمدة 5 دقائق تقريبًا لمنتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المُضخَّمة بواسطة بوليميراز التدقيق ذي النهايات غير المتداخلة بالناقل. الخلايا المؤهلة: خياران: اختر من بين مجموعات ذات كفاءة عالية أو خلايا مؤهلة سريعة النمو. سهولة الوصول إلى نظام Gateway™: للوصول إلى نظام Gateway™، ما عليك سوى تضخيم الجين الذي ترغب فيه باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وإضافة المنتج مباشرةً إلى ناقل pENTR™/SD/D-TOPO™ المُزوَّد بإنزيم توبويزوميراز، ثم حضانته لمدة 5 دقائق، وتحويل خلايا الإشريكية القولونية المؤهلة المُزوَّدة. تُصبح مستنسخات Gateway™ Entry الناتجة، الحاملة لجين attL، جاهزةً لإعادة التركيب بكفاءة مع نواقل Gateway™ Destination التي تختارها. ناقل pENTR™ /SD/D-TOPO™ المُحسَّن (الشكل 1) يتضمن مُحسِّن ترجمة T7 gene 10 وموقع ارتباط الريبوسوم (RBS) للتعبير الأمثل عن البروتين الأصلي بعد إعادة التركيب مع نواقل Gateway™ Destination بدائية النواة. يمكنك أيضًا استخدام الناقل للتعبير في أنظمة مضيفة أخرى عن طريق إعادة التركيب مع نواقل وجهة مختلفة. يحتوي الناقل على مواقع تسلسل بادئات M13 وT7 ومواقع إعادة تركيب attL تُحيط بموقع إدخال ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). هذا يسمح بالتحقق من تسلسل المستنسخات بسهولة وإعادة تركيبها في نواقل Gateway™ Destination التي تحمل جين attR والتي تختارها. يُستخدم جين مقاومة الكاناميسين وأصل pUC للاختيار والتكاثر عالي النسخ في بكتيريا الإشريكية القولونية. استنساخ اتجاهي مُبسّط: مع تقنية الاستنساخ الاتجاهي TOPO™، لا حاجة لتنظيف تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)، أو تحضير الناقل، أو أي خطوات أخرى مُستهلكة للوقت في معالجة الحمض النووي. ما عليك سوى إضافة تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) مباشرةً إلى الناقل المُزوّد بإنزيم توبويزوميراز، وحضانته لمدة 5 دقائق، ثم تحويله، لتحصل على ما يصل إلى 90% من المستنسخات المُدخلة اتجاهيًا. يتزاوج طرف مُتدلٍّ من أربع قواعد على الناقل مع تسلسل من أربع قواعد مُصمّم في البادئ الأمامي المُستخدم في تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) لتوفير الاتجاهية لتفاعل ربط إنزيم توبويزوميراز (الشكل 2). قوة تقنية الاستنساخ بإعادة التركيب Gateway™: تتجاوز تقنية الاستنساخ بإعادة التركيب Gateway™ قيود الاستنساخ المُعتمد على التقييد، مما يُتيح لك الوصول إلى أي نظام تعبير تقريبًا في تفاعل إعادة تركيب Gateway™ بسيط، يستغرق ساعة واحدة، بكفاءة 99% وقابل للعكس. تتيح لك القدرة على نقل نفس تسلسل الحمض النووي بين نواقل مختلفة دون استخدام إنزيمات التقييد أو الليغاز أو خطوات الاستنساخ الفرعي أو فحص عدد لا يحصى من المستعمرات أو إعادة التسلسل، توفير الوقت والمال والجهد. تقنيات الاستنساخ الرائدة: عندما يتعلق الأمر بالاستنساخ، تُعد تقنية استنساخ TOPO™ وتقنية استنساخ إعادة التركيب Gateway™ شريكًا موثوقًا به لآلاف العلماء لأكثر من عشر سنوات. تتميز تقنيتا TOPO™ و Gateway™ بالسرعة وسهولة الاستخدام والكفاءة، حيث تسمحان بالاستنساخ السريع ونقل الجينات لاحقًا بين مجموعة واسعة من نواقل التعبير Gateway™. خيارات المجموعة: يمكن شراء مجموعة استنساخ pENTR™/SD/D-TOPO™ إما بخلايا TOP10 المؤهلة للاستنساخ القياسي أو بخلايا Mach1™-T1R المؤهلة للنمو السريع. طريقة الاستنساخ: TOPO™ الاتجاهي
عدد التفاعلات: 20 تفاعلاً
خط الإنتاج: ون شوت™
نوع المنتج: طقم استنساخ TOPO
الكمية: 20 تفاعلاً
المتجه: بينتر
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924