Thermo Fisher، K243520، مجموعة استنساخ pENTR™/D-TOPO™، مع بكتيريا الإشريكية القولونية One Shot™ Mach1™-T1R المؤهلة كيميائيًا

مجموعة استنساخ pENTR™/D-TOPO™، مع بكتيريا الإشريكية القولونية One Shot™ Mach1™-T1R المُؤهلة كيميائيًا. تستخدم مجموعات استنساخ pENTR™/D-TOPO™ استراتيجية استنساخ عالية الكفاءة تستغرق 5 دقائق ("استنساخ TOPO™") لاستنساخ منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذي النهايات غير المتداخلة بشكل موجه في ناقل لإدخاله في نظام Gateway™ أو نظام MultiSite Gateway™. يتم استنساخ منتجات PCR ذات النهايات غير المتداخلة بشكل موجه بكفاءة تزيد عن 90%، دون الحاجة إلى إنزيم الربط أو إجراءات ما بعد تفاعل البوليميراز المتسلسل أو إنزيمات التقييد. تحتوي المجموعة على كل ما يلزم لاستنساخ واختيار الجين المُضخّم بتقنية PCR الذي ترغب به.
• جاهز لنظام Gateway™ - ينقل الجينات المستنسخة بسرعة بين أنظمة ناقلات متعددة
• سريع وسهل - انتقل من تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) إلى استنساخ Gateway™ Entry في 3 خطوات فقط وفي غضون 5 دقائق فقط من العمل اليدوي
• فعال - يحقق أكثر من 90% من الاستنساخ مع الإدخال الصحيح في الاتجاه الصحيح
• أداء موثوق به ومثبت لأكثر من عقد من الزمان. نظرة عامة على مجموعات استنساخ pENTR™/D-TOPO™: ناقل pENTR™/D-TOPO™: ناقل استنساخ موجه للدخول إلى نظام Gateway. طريقة الاستنساخ: استنساخ TOPO™ موجه: ربط موجه لمنتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المُضخمة بواسطة بوليميراز التصحيح ذي النهايات غير المتداخلة بالناقل، ويستغرق ذلك حوالي 5 دقائق، ويعتمد على إنزيم توبويزوميراز I. الخلايا المؤهلة: خياران: اختر من بين مجموعات ذات كفاءة عالية أو خلايا مؤهلة سريعة النمو. سهولة الوصول إلى نظام Gateway™: للوصول إلى نظام Gateway™، ما عليك سوى تضخيم الجين المطلوب باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وإضافة الناتج مباشرةً إلى ناقل pENTR™/D-TOPO™ المُزود بإنزيم توبويزوميراز، ثم حضانته لمدة 5 دقائق، وتحويل خلايا E. coli المؤهلة المُزودة. ستكون مستنسخات الدخول إلى Gateway™ الناتجة، والتي تحتوي على attL، جاهزة لإعادة التركيب بكفاءة مع نواقل الوجهة إلى Gateway™ التي تختارها. ناقل pENTR™/D-TOPO™ المُحسَّن: يتضمن ناقل pENTR™/D-TOPO™ (الشكل 1) مواقع تسلسل بادئات M13 وT7، ومواقع إعادة تركيب attL تُحيط بموقع إدخال ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يُتيح ذلك التحقق من تسلسل المستنسخات بسهولة وإعادة تركيبها في نواقل Gateway™ الوجهة التي تختارها والتي تحتوي على attR. يُستخدم جين مقاومة الكاناميسين ومنشأ pUC للاختيار والتكاثر عالي النسخ في بكتيريا الإشريكية القولونية. استنساخ اتجاهي مُبسَّط: بفضل تقنية الاستنساخ الاتجاهي TOPO™، لا حاجة لتنظيف ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل، أو تحضير الناقل، أو أي خطوات أخرى مُستهلكة للوقت في معالجة الحمض النووي. ما عليك سوى إضافة ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل مباشرةً إلى الناقل المُزوَّد بإنزيم توبويزوميراز، وحضانته لمدة 5 دقائق، ثم تحويله، والحصول على ما يصل إلى 90% من المستنسخات المُدخلة اتجاهيًا. يتحد تسلسل رباعي القواعد على الناقل مع تسلسل رباعي القواعد مصمم في البادئ الأمامي المستخدم في تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) لتوفير التوجيه لتفاعل ربط التوبويزوميراز (الشكل 2). قوة تقنية الاستنساخ بالإعادة التركيبية Gateway™: تتجاوز تقنية الاستنساخ بالإعادة التركيبية Gateway™ قيود الاستنساخ المعتمد على التقييد، مما يتيح لك الوصول إلى أي نظام تعبير تقريبًا في تفاعل إعادة تركيبي بسيط لمدة ساعة واحدة، بكفاءة 99% وقابل للعكس. إن القدرة على نقل نفس تسلسل الحمض النووي بين نواقل مختلفة دون استخدام إنزيمات التقييد أو الليغاز أو خطوات الاستنساخ الفرعي أو فحص عدد لا يحصى من المستعمرات أو إعادة التسلسل، ستساعدك على توفير الوقت والمال والجهد. تقنيات الاستنساخ الرائدة: عندما يتعلق الأمر بالاستنساخ، كانت تقنية الاستنساخ TOPO™ وتقنية الاستنساخ بالإعادة التركيبية Gateway™ شريكًا موثوقًا به لآلاف العلماء لأكثر من عشر سنوات. تقنية TOPO™ للاستنساخ وإعادة التركيب Gateway™ سريعة وسهلة الاستخدام وفعالة، وتتيح استنساخ الجينات ونقلها بسرعة بين مجموعة واسعة من نواقل التعبير Gateway™. خيارات المجموعة: يمكن شراء مجموعة استنساخ pENTR™/D-TOPO™ إما مع خلايا TOP10 المؤهلة للاستنساخ القياسي أو مع خلايا Mach1™-T1R المؤهلة للنمو السريع. للاستخدام البحثي فقط. غير مخصص للاستخدام في العلاجات أو التشخيصات الحيوانية أو البشرية. طريقة الاستنساخ: TOPO™ الموجه
عدد التفاعلات: 20 تفاعلاً
خط الإنتاج: ون شوت™
نوع المنتج: طقم استنساخ TOPO
الكمية: 20 تفاعلاً
المتجه: بينتر
حجم الوحدة: كل وحدة