Thermo Fisher، PV4548، مجموعة اختبار LanthaScreen™ TR-FRET PPAR gamma Coactivator، الماعز

مجموعة اختبار LanthaScreen™ TR-FRET لتنشيط PPAR gamma، من الماعز. تحتوي هذه المجموعة على جسم مضاد من الماعز مُوسَم بالتيربيوم (Tb) ومُضاد لـ GST؛ أما باقي مكونات المجموعة فهي نفسها الموجودة في المجموعة A15126. توفر مجموعة اختبار LanthaScreen™ TR-FRET لتنشيط PPAR gamma طريقة حساسة ودقيقة لفحص عالي الإنتاجية لروابط PPAR gamma المحتملة كمنشطات أو مثبطات لتجنيد المنشطات المساعدة المعتمدة على الروابط. تستخدم المجموعة جسمًا مضادًا مُوسَمًا بالتيربيوم (Tb) ومُضادًا لـ GST، وببتيدًا مُنشطًا مساعدًا مُوسَمًا بالفلوريسين، ونطاق ربط رابط مستقبلات PPAR gamma (PPAR gamma-LBD) مُوسَمًا بإنزيم ناقل الغلوتاثيون-S (GST)، وذلك في شكل اختبار متجانس يعتمد على المزج والقراءة.
في وضع المُنشِّط، ولإجراء اختبار LanthaScreen™ TR-FRET لمُنشِّط مستقبلات جاما المُنشِّطة لمُكاثرات البيروكسيسوم في وضع المُنشِّط (لتحديد المركبات المُنشِّطة)، يُضاف نطاق ربط الليجاند (LBD) لمستقبلات جاما المُنشِّطة لمُكاثرات البيروكسيسوم إلى مركبات اختبار الليجاند، ثم يُضاف مزيج من ببتيد المُنشِّط المُفلور وجسم مضاد Tb-anti-GST. بعد فترة حضانة في درجة حرارة الغرفة، تُحسب نسبة انبعاث TR-FRET 520:495 وتُستخدم لتحديد قيمة EC50 من منحنى استجابة الجرعة للمركب. استنادًا إلى بيولوجيا تفاعل ببتيد مُنشِّط مستقبلات جاما المُنشِّط لمُكاثرات البيروكسيسوم، فإن قيمة EC50 لليجاند هذه هي قيمة مركبة تُمثل كمية الليجاند اللازمة للارتباط بالمستقبل، وإحداث تغيير في بنيته، واستقطاب ببتيد المُنشِّط (الشكل 1).
في وضع التثبيط، عند إجراء اختبار LanthaScreen™ TR-FRET لمُنشِّط مستقبلات جاما المُنشِّط لمُكاثرات البيروكسيسوم في وضع التثبيط (لتحديد المركبات المُثبِّطة)، يُضاف نطاق ربط الليجاند لمستقبلات جاما المُنشِّط لمُكاثرات البيروكسيسوم إلى مركبات اختبار الليجاند، ثم يُضاف مزيج من المُنشِّط، وببتيد مُنشِّط مُفلور، وجسم مضاد Tb-anti-GST. تركيز المُنشِّط المُستخدم في هذا الوضع هو تركيز EC80 الذي تم تحديده أولاً بإجراء الاختبار في وضع المُنشِّط (الشكل 2).
المحتويات والتخزين: تحتوي مجموعة اختبار LanthaScreen™ TR-FRET PPARγ Coactivator على بروتين PPAR gamma-LBD (GST)، وببتيد TRAP220/DRIP-2 المنشط المساعد الموسوم بالفلورسنت، وجسم مضاد Tb-anti-GST، ومحاليل منظمة. يُحفظ المكونان وفقًا لما هو موضح في بروتوكول الاختبار (-80 درجة مئوية، -20 درجة مئوية، أو +4 درجات مئوية).
إدخال التحليل: التفاعل بين المنظمات الكيميائية الحيوية المساعدة
طريقة الكشف: التألق
للاستخدام مع (التطبيق): فحص تفاعل العوامل المساعدة، TR-FRET
للاستخدام مع (المعدات): قارئ الألواح الدقيقة
معرف الجين (Entrez): 5468
الرابط: PPAR Gamma
عدد الاختبارات: 800 اختبار × 20 ميكرولتر
التغليف: صفيحة ذات 384 بئراً
نوع المنتج: مجموعة اختبار TR-FRET لمنشط PPAR Gamma المشترك
الكمية: 800 × 20 ميكرولتر من العينات
القراءة: نقطة النهاية
شروط الشحن: ثلج جاف
المدخل المستهدف: PPARG، PPAR gamma، NR1C3
المرافق: تيربيوم (Tb)
خط الإنتاج: LanthaScreen™
حجم الوحدة: كل وحدة