Product Description
ناقل الحمض النووي pUC18 من شركة Thermo Scientific هو ناقل صغير الحجم ذو عدد نسخ عالٍ، وهو بلازميد من بكتيريا الإشريكية القولونية، ويبلغ طوله 2686 زوجًا قاعديًا. يحتوي على مواقع استنساخ متعددة (MCS) مطابقة لتلك الموجودة في ناقل pUC19، إلا أنها مرتبة في اتجاه معاكس.
أبرز النقاط
• تم تنقيته بواسطة تقنية الكروماتوغرافيا باستخدام تقنية حاصلة على براءة اختراع خاصة
• أكثر من 90% في شكل اللفائف الفائقة
• معزولة عن E.
coli(dam+,dcm+)
• للحصول على تسلسل الحمض النووي pUC18، وتسلسل الحمض النووي pUC19، وتحليل التسلسل وإنشاء الخرائط، انظر إلى أداة المراجعة المجانية عبر الإنترنت.
التطبيقات
• الاستنساخ
• تسلسل الحمض النووي المُدخل، الحمض النووي pUC18: تحضير معايير الوزن الجزيئي للحمض النووي، محتويات بلازميد pUC18/19 وملاحظات الاستخدام - تحتوي بلازميدات pUC18/19 على:
• يُعدّ مُضاعِف البلازميد pMB1 مسؤولاً عن تضاعف البلازميد (المصدر: البلازميد pBR322). ويعود العدد الكبير لنسخ بلازميدات pUC إلى غياب الجين المُحفِّز وطفرة نقطية واحدة في مُضاعِف البلازميد pMB1.
• يُكسب الجين blagene، الذي يُشفّر إنزيم بيتا لاكتاماز، مقاومةً للأمبيسيلين (مصدره البلازميد pBR322). ويختلف عن البلازميد pBR322 بوجود طفرتين نقطيتين.
• منطقة E.
يحتوي جين lacZ في بكتيريا الإشريكية القولونية على موقع ارتباط بروتين CAP، ومحفز Plac، وموقع ارتباط مثبط lacZ، والجزء الطرفي 5' من جين lacZ الذي يشفر الجزء الطرفي N من إنزيم بيتا-جالاكتوزيداز (المصدر: M13mp18/19). هذا الجزء، الذي يمكن تحفيز تصنيعه بواسطة IPTG، قادر على التكامل داخل الأليل (ألفا) مع شكل معيب من إنزيم بيتا-جالاكتوزيداز مشفر بواسطة العائل (الطفرة دلتا(lacZ)M15). في وجود IPTG، تُصنّع البكتيريا كلا جزئي الإنزيم وتُشكّل مستعمرات زرقاء على أوساط تحتوي على X-Gal. يؤدي إدخال الحمض النووي في موقع النسخ المتعدد (MCS) الموجود داخل جين lacZ (حيث يتم استبدال الكودونات 6-7 من lacZ بموقع النسخ المتعدد) إلى تعطيل الجزء الطرفي N من إنزيم بيتا-جالاكتوزيداز وإلغاء التكامل ألفا. لذا، تُنتج البكتيريا الحاملة للبلازميدات المُعاد تركيبها مستعمرات بيضاء. تُظهر الخريطة الإنزيمات التي تقطع الحمض النووي pUC18 مرة واحدة. الإنزيمات التي تنتجها شركة Thermo Scientific مُوضحة باللون البرتقالي. تُشير الإحداثيات إلى موضع النيوكليوتيد الأول في كل تسلسل تعرّف.
تُظهر الخريطة المواقع الدقيقة للعناصر الوراثية (بما في ذلك كودونات الإنهاء). تُشفّر نيوكليوتيدات جين بيتا-جالاكتوزيداز من 2486 إلى 2418 (السلسلة المُكمّلة) ببتيد إشارة. ينتهي عديد الببتيد LacZ، المُطابق لبيتا-جالاكتوزيداز الطبيعي والضروري لفحص اللون الأزرق/الأبيض، عند الموضع 236 (السلسلة المُكمّلة). تُشتق 30 كودونًا أخرى في نفس إطار القراءة من البلازميد pBR322. المنطقة المُشار إليها كافية لتحفيز التضاعف. يبدأ تضاعف الحمض النووي من الموضع 866 (± 1) ويستمر في الاتجاه المُشار إليه. البلازميدات الحاملة لنسخ pMB1 وColE1 غير متوافقة، لكنها متوافقة تمامًا مع تلك الحاملة لنسخة p15A (pACYC177، pACYC184). يمكن تضخيم البلازميدات المُشتقة من pMB1 باستخدام الكلورامفينيكول.
طريقة الاستنساخ: إنزيم التقييد / MCS
التركيز: 0.
5 ميكروغرام/ميكرولتر
نوع المنتج النهائي: الحمض النووي (DNA)
للاستخدام مع (التطبيق): الاستنساخ
نوع المنتج: الحمض النووي
الكمية: 50 ميكروغرام
نوع العينة: الحمض النووي
المتجه: pUC18
حجم الوحدة: 50 ميكروغرام
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924