Sistemas de interferometría de biocapa (Octet) de Sartorius para cinética y afinidad

Busca una forma más rápida y sin fluídica de obtener datos fiables de cinética, afinidad y titulación, incluso de sobrenadantes crudos. Los sistemas de interferometría de biocapa (BLI) Sartorius Octet® combinan la detección en tiempo real sin etiquetas con biosensores desechables de "inmersión y lectura", lo que le permite cribar, cuantificar y caracterizar proteínas, anticuerpos, interacciones Fc/FcRn, cápsides de AAV y más, con un desarrollo de método mínimo.

Interferometría de biocapas Sartorius Octet de un vistazo

Octet BLI mide el desplazamiento de longitud de onda que se produce cuando un analito se une a un ligando en un sensor de fibra óptica, generando curvas de asociación y disociación en tiempo real para ka, kd y KD, junto con lecturas de cuantificación rápidas. Dado que las muestras se introducen en el sensor (sin fluídica interna), se trabaja directamente en placas de 96 o 384 pocillos, se reduce la carga de mantenimiento y se analizan matrices complejas, como sobrenadantes de cultivo o lisados, con total confianza.

Beneficios de un vistazo

• Cinética y afinidad en tiempo real, sin etiquetas (ka, kd, KD)
• Cuantificación rápida de títulos a partir de muestras crudas
• Flujo de trabajo sin fluidos, de “inmersión y lectura”

Cómo funciona la interferometría de biocapa (BLI) y por qué Octet es diferente

La interferencia es fundamental: la luz se refleja desde una referencia interna y desde la superficie del biosensor; la unión aumenta el espesor óptico y modifica el patrón de interferencia. El formato abierto de Octet, basado en placas, permite mover los sensores entre pocillos, lo que permite paralelizar ensayos sin canales microfluídicos y evitar obstrucciones, cebado o largas rutinas de limpieza in situ. Es un contraste práctico con la SPR basada en flujo y un potente complemento cuando se necesitan ambas técnicas.

Por qué es importante para ti

• La configuración es rápida y el desarrollo del método es flexible.
• Analizar tanto moléculas pequeñas como complejos grandes.
• Utilice Octet como un método independiente o como un método ortogonal con SPR.

Aplicaciones de BLI: cinética, titulación, agrupamiento de epítopos y más

Octet BLI apoya su proceso de desarrollo, desde el descubrimiento inicial hasta el análisis de procesos, sin forzar un único formato de ensayo. Puede perfilar la cinética de unión y la afinidad en tiempo real, cuantificar el título de proteínas directamente a partir de sobrenadantes crudos y resolver las relaciones de anticuerpos mediante la clasificación de epítopos o la clasificación fuera de tasa. Los ejemplos a continuación destacan casos de uso comunes y fáciles de tomar decisiones, para que pueda adaptar los objetivos de su estudio al ensayo más rápido y viable.

• Cinética y afinidad: determinar ka, kd, KD para interacciones proteína-proteína, Fc/FcRn y moléculas pequeñas.
• Cuantificación/titulación: Concentración rápida de IgG/proteína mediante proteína A o captura basada en etiquetas; las plantillas de software aceleran la configuración.
• Clasificación por agrupamiento de epítopos y clasificación fuera de rango: las campañas de clasificación por agrupamiento de 32 × 32 y la clasificación fuera de rango de placa completa acortan la clasificación de clones.
• Vectores virales: medición directa del título de la cápside de AAV con biosensores AAVX en matrices ascendentes y descendentes.

Qué incluye: instrumentos Octet, biosensores, tampones y software

El ecosistema Octet está diseñado para estar listo para usar: instrumentos para el rendimiento que necesita, biosensores de "inmersión y lectura" que se adaptan a su estrategia de captura, placas y tampones aprobados para cinética o cuantificación, y software de análisis para pasar de curvas sin procesar a informes. Utilice esta sección para seleccionar los componentes básicos que se ajusten a sus objetivos, tipos de muestra y requisitos de cumplimiento.

• Instrumentos : Serie R de sobremesa (por ejemplo, R8) para trabajo diario flexible; serie RH (RH16/RH96) para detección paralela y automatización.

• Biosensores : productos químicos listos para usar (proteína A/G/L, estreptavidina (SA), Ni-NTA/Anti-His, AAVX) que cubren captura, cinética y cuantificación.

• Reactivos y placas : el diluyente de muestra 18-1104 , el tampón cinético 18-1105 y las placas de 384 pocillos de bajo volumen admiten ejecuciones de alto rendimiento.

• Software : Octet BLI Discovery (adquisición) y Octet Analysis Studio (análisis de múltiples placas, informes, 21 CFR Parte 11 opcional).

¿Por qué elegir Octet BLI?: Sin fluidos, rápido y escalable

Octet reemplaza las frágiles rutas de flujo con detección basada en placa, lo que reduce el mantenimiento y acorta el desarrollo de métodos. Puede ejecutar cinética en tiempo real y titulación de alto rendimiento en la misma plataforma, incluso en matrices complejas, y luego escalar desde pantallas piloto hasta campañas de binning sin tener que rediseñar su flujo de trabajo. Los puntos a continuación resumen dónde BLI suele ahorrarle más tiempo.

• Fiabilidad sin fluidos con sensores desechables
• Rendimiento escalable de 8 canales a 96 sensores en paralelo
• Funciona con muestras crudas (sobrenadantes, lisados)
• Automatización sin intervención en la serie RH con plantillas de ensayo robustas
• Opciones preparadas para GxP con software 21 CFR Parte 11 y kits IQ/OQ/PQ

Instrumentos Octet BLI: modelos y especificaciones

Elija su plataforma según sus necesidades de rendimiento, combinación de ensayos e integridad de datos. Los sistemas de la serie R son flexibles para la cinética y la cuantificación diarias, mientras que los instrumentos de la serie RH incorporan detección paralela para cribados de placa completa y automatización. La tabla resume los canales, la compatibilidad de placas y las opciones de cumplimiento normativo para que pueda seleccionar un modelo antes de consultar las hojas de datos detalladas.

Biosensores Octet: Guía de selección y uso

La química del biosensor determina cómo se capturan los analitos y qué equilibrio se debe lograr entre regeneración, sensibilidad y tolerancia a la matriz. Comience con la etiqueta o dominio confiable (Fc, His, biotina, cápside) y luego asigne un sensor optimizado para cinética o cuantificación. Utilice la guía a continuación para elegir un sensor inicial y confirmar la regeneración y los límites de tampón antes del uso rutinario.

Guía de decisiones: Elija la configuración BLI de Octet adecuada

Comience con su resultado principal (cinética, titulación o binning) y luego ajuste la complejidad de la muestra y los recuentos diarios en placa. El desarrollo de métodos de bajo rendimiento es cómodo en los sistemas de la serie R; los cribados de alta densidad y la clasificación fuera de rango favorecen a los instrumentos de la serie RH. Las siguientes reglas rápidas le ayudan a seleccionar canales y la química del sensor sin sobreespecificar la plataforma.

1. El objetivo primero

• Cinética/afinidad → R8 para desarrollo de métodos flexibles; RH16 si crecen placas/réplicas; RH96 para matrices grandes y clasificación.
• Título/rendimiento → RH16/RH96 con sensores de proteína A o etiqueta His.
• Binning → RH96 para campañas de 32×32 o más grandes.

2. Complejidad de la muestra

• Los sobrenadantes/lisados ​​crudos favorecen el formato abierto de BLI; elija tampones por TN del sensor para controlar la unión no específica y evitar quelantes para Ni-NTA.

3. Cumplimiento

• Para entornos regulados, seleccione paquetes GxP (software 21 CFR Parte 11 + IQ/OQ/PQ).

BLI vs SPR vs ELISA: Cuándo usar cada uno

BLI, SPR y ELISA responden a preguntas relacionadas, pero diferentes. BLI prioriza la velocidad y la tolerancia a la matriz con detección en placa sin etiquetas; SPR ofrece precisión de flujo basada en chip para cinética confirmatoria; ELISA proporciona cuantificación de punto final establecida a escala. Utilice la tabla de comparación para orientar su estudio en el método correcto y determinar cuándo una lectura ortogonal aporta mayor confianza.

Preguntas frecuentes sobre Octet BLI

P1. Sensores de proteína A o de estreptavidina: ¿cómo elijo?
Utilice proteína A para la titulación de IgG/captura rápida de anticuerpos que contienen Fc; utilice SA cuando ya tenga un ligando biotinilado o necesite una inmovilización flexible para la cinética.

P2. ¿Puedo analizar directamente las proteínas His-tag?
Sí. Los sensores Ni-NTA permiten la cuantificación y captura directa para cinética: garantizan que los tampones estén libres de EDTA/imidazol o quelantes similares.

P3. ¿Qué tan rápido es el binning de alto rendimiento en Octet?
En RH96 , una campaña de binning de 32×32 se puede completar en menos de ocho horas, con una clasificación fuera de tarifa de placa completa en minutos.

P4. ¿Los sistemas Octet admiten la cinética de moléculas pequeñas?
Sí. La serie Octet R admite la caracterización de moléculas pequeñas con un diseño de ensayo y un control de tampón adecuados.

Solicite una cotización o hable con un especialista en aplicaciones

Indíquenos qué método utiliza (cinética, titulación o binning), el rendimiento esperado (muestras/placa/día), el tipo de muestra (sobrenadante, lisado, purificada) y si necesita buenas prácticas de laboratorio (GxP). Contáctenos ahora mismo y le ayudaremos a elegir el instrumento y los biosensores Octet adecuados, compartiremos plantillas de métodos y analizaremos los materiales de validación.