Proteínas y péptidos Thermo Fisher: reactivos de biología de proteínas, purificación y síntesis de péptidos

Ya sea que cuantifique lisados, purifique proteínas marcadas, visualice blots o prepare péptidos para LC-MS, Thermo Fisher ofrece herramientas integrales bajo líneas reconocidas como Pierce™ e Invitrogen™. En esta página encontrará orientación estructurada, comparaciones rápidas y familias de productos destacados. Iright, como distribuidor autorizado, puede encontrar una amplia gama de productos Thermo Fisher para su laboratorio.

Comprar por categorías principales: Ensayos, Western, Purificación, Reticuladores, Preparación de MS y Péptidos

Utilice la descripción general a continuación para acceder directamente a lo que necesita. Cada categoría resume casos de uso típicos y opciones comunes para que pueda decidir más rápido. Los enlaces internos de esta sección pueden asignarse a subcolecciones más completas (por ejemplo, BCA vs. Bradford o Ni-NTA vs. Co-NTA) si desea ampliar el contenido más adelante.

• Cuantificación y tinciones de proteínas : kits de ensayo BCA y Bradford, opciones compatibles con UV, tinciones de azul de Coomassie, estándares/marcadores de proteínas.

• Electroforesis y Western Blot : geles prefabricados (Bis-Tris, Tris-glicina), tampones de transferencia/corredor, membranas de PVDF/nitrocelulosa, sustratos quimioluminiscentes, escaleras de proteínas.

• Purificación por afinidad : etiqueta His (Ni-NTA/Co-NTA), proteína A/G para IgG, perlas magnéticas y resinas de columna, tampones de elución suaves.

• Reticulación y etiquetado : químicas de ésteres NHS y maleimida, reticulantes de longitud cero, biotinilación y kits de etiquetado fluorescente.

• Preparación de muestras para LC-MS : reactivos de reducción/alquilación, kits de digestión con tripsina/Lys-C, columnas/placas de centrifugación de desalinización, solventes de grado LC-MS.

• Péptidos : péptidos de referencia/estándar, péptidos modificados (fosfo/acetilo/biotina/fluorescentes) y síntesis de péptidos personalizada con documentación de control de calidad.

Flujos de trabajo populares: Western Blot, Co-IP/Pull-Down y preparación de muestras LC-MS

Seleccionar productos por flujo de trabajo reduce las conjeturas y evita incompatibilidades. Las siguientes rutas rápidas combinan pasos típicos con familias de productos representativas, para que pueda crear una pila validada que se ajuste a su protocolo y presupuesto sin tener que repasar los fundamentos cada vez.

Flujo de trabajo de Western Blot (WB)

1. Lisis y protección: tampones de lisis suaves o fuertes con inhibidores de proteasa/fosfatasa.

2. Cuantificación: BCA o Bradford para normalizar la carga.

3. Electroforesis: elija geles Bis-Tris o Tris-glicina adecuados a su rango de tamaño objetivo.

4. Transferencia: Membranas de PVDF o nitrocelulosa; considere el tamaño de poro frente al peso molecular de la proteína.

5. Detección: Sustratos quimioluminiscentes ECL alineados con sus necesidades de señal (sensibilidad estándar vs. alta).

Flujo de trabajo Co-IP/Pull-Down

1. Prelimpieza y captura: perlas magnéticas o de agarosa acopladas a proteína A/G o su ligando.

2. Lavado y elución: tampones adaptados a sal/detergente; elución suave para lograr estabilidad compleja.

3. Análisis posterior: SDS-PAGE + WB o LC-MS.

Flujo de trabajo de proteómica LC-MS

1. Desnaturalizar/Reducir/Alquilar: manejo consistente de disulfuro para mejorar la cobertura de péptidos.

2. Resumen: tripsina o Lys-C de grado secuencial en proporciones y puntos de tiempo definidos.

3. Desalinizar y concentrar: columnas de centrifugación o platos compatibles con su sistema de disolventes.

4. Analizar: Disolventes de grado LC-MS para minimizar la supresión de fondo e iones.

Comparar opciones clave: BCA vs. Bradford, Ni-NTA vs. Co-NTA, proteína A vs. G, sistemas de gel

Cuando existen varias opciones "buenas", una comparación clara le ayudará a elegir la mejor para su muestra y lectura. Utilice las tablas como referencia y luego acceda a páginas más completas si desea obtener detalles exhaustivos o notas de aplicación.

Cuantificación de proteínas de un vistazo

Resinas de purificación de etiquetas His

Proteína A vs. Proteína G para IgG

Sistemas de gel prefabricados

Fundamentos de péptidos: estándares, síntesis de péptidos personalizada y modificaciones comunes

Los péptidos facilitan el desarrollo de métodos, la calibración de ensayos y los estudios de mecanismos. Puede adquirir estándares listos para enviar o solicitar secuencias personalizadas con pureza y documentación definidas. Planifique la pureza y las modificaciones con antelación para evitar desviaciones del proyecto y la repetición de pedidos posteriormente.

• Péptidos de referencia/estándar: se utilizan para calibración LC-MS, alineación del tiempo de retención o verificación de métodos.

• Síntesis de péptidos personalizada: especifique la secuencia, la longitud, la escala (mg a g) y la pureza objetivo (desalado/purificado por HPLC).

• Modificaciones comunes: fosforilación, acetilación, biotinilación, marcaje fluorescente (FITC, TAMRA), amidación y lipidación.

• Documentación de control de calidad: cromatogramas MS y HPLC, COA; análisis de aminoácidos opcional a pedido.

• Guía de disolución: combine el solvente con la hidrofobicidad (agua, 0,1 % de TFA, 10-50 % de acetonitrilo o semilla de DMSO) y luego diluya en el tampón de ensayo.

Compatibilidad y validación: tolerancia de tampón/detergente, control de calidad (HPLC/MS/COA) y datos

El éxito del método depende de la compatibilidad de los reactivos y la consistencia entre lotes. Siempre que sea posible, elija kits y consumibles validados conjuntamente y revise las instrucciones de uso y las fichas de datos de seguridad (FDS) para comprobar la tolerancia a detergentes, sales y agentes reductores. Guarde una simple "hoja de compatibilidad" en su cuaderno de laboratorio para realizar comprobaciones rápidas.

• Tolerancia del tampón/detergente: confirme la compatibilidad de BCA/Bradford con su tampón de lisis; verifique los reticulantes para detectar reactividad de amina o sulfhidrilo en presencia de Tris/DTT.

• Práctica de control de calidad: prefiera reactivos con certificados a nivel de lote y rangos de rendimiento establecidos; para péptidos, mantenga los rastros de MS/HPLC archivados con las fechas de recepción.

• Continuidad de datos: registre el sistema de gel, el tipo de membrana, el lote de anticuerpos y el sustrato al optimizar WB para poder reproducir los niveles de señal en todas las ejecuciones.

Productos destacados: Familias de alta demanda en ensayos, Western, purificación y péptidos

A continuación, se presentan familias de productos representativas que coinciden con las intenciones de compra comunes. Para garantizar la precisión, inserte los nombres de los modelos/SKU solo después de verificarlos en el sitio web de Thermo Fisher; omitimos deliberadamente los números para cumplir con su requisito de que los SKU sean correctos.

• Kits de ensayo de proteínas BCA : formatos de microplacas y tubos; amplio rango lineal; compatibles con muchos detergentes.

• Kits de ensayo Bradford : lectura rápida de unión de tinte; conveniente cuando la velocidad importa más que la tolerancia al detergente.

• Geles prefabricados (Bis-Tris / Tris-glicina) : múltiples porcentajes y formatos de gradiente para adaptarse al tamaño objetivo.

• Membranas de PVDF/nitrocelulosa : opciones de tamaño de poro para proteínas pequeñas o grandes; formulaciones de bajo fondo disponibles.

• Sustratos quimioluminiscentes ECL : seleccione estándar, sensible o ultrasensible según la abundancia del objetivo.

• Resinas y perlas magnéticas Ni-NTA/Co-NTA : escalables desde centrifugación hasta gravedad y FPLC; elija Co para una mayor especificidad.

• Perlas de proteína A/G : captura confiable de IgG para IP/Co-IP; disponibles en formatos magnéticos y de agarosa.

• Kits de digestión con tripsina y lisina-C : enzimas de grado de secuenciación con protocolos claros y opciones de limpieza.

• Columnas/placas de centrifugación de desalinización : intercambio rápido de tampón antes de los pasos de MS o etiquetado.

• Péptidos de referencia y personalizados : estándares para control de calidad de métodos y secuencias totalmente personalizadas con documentación MS/HPLC.

Preguntas frecuentes

P1. BCA vs. Bradford: ¿cómo debo elegir?
Elija BCA para un rango lineal más amplio y una mejor compatibilidad con muchos detergentes; elija Bradford cuando necesite resultados rápidos y su tampón no tenga detergentes que interfieran.

P2. ¿Ni-NTA o Co-NTA para proteínas etiquetadas con His?
Comience con Ni-NTA por su capacidad y costo; cambie a Co-NTA cuando necesite mayor pureza o observe una unión no específica.

P3. ¿Qué química del reticulante se adapta a mi experimento?
Utilice reactivos de éster NHS para aminas (p. ej., lisina); maleimida para tioles libres (cisteína). Las opciones de longitud cero conservan la distancia nativa, pero requieren pares reactivos.

P4. ¿Cómo preparo muestras para LC-MS?
Reducir/alquilar para controlar disulfuros, digerir con tripsina de grado secuencial o Lys-C, luego desalinizar en columnas de centrifugación o placas antes de cargar con solventes de grado LC-MS.

P5. ¿Qué pureza de péptido debo solicitar?
El desarrollo y la selección de métodos pueden comenzar con material desalinizado ; los ensayos cuantitativos o estándares generalmente requieren péptidos purificados por HPLC con documentos MS/HPLC.

P6. ¿Cómo deben almacenarse los péptidos?
Conservar los péptidos liofilizados a -20 °C (o menos), protegidos de la humedad y la luz; dividir las soluciones en alícuotas para minimizar los ciclos de congelación y descongelación y seguir el COA para comprobar la estabilidad.

Habla con Iright

Si necesita ayuda para elegir o un presupuesto formal, contacte con Iright. Podemos confirmar la disponibilidad actual, recomendar kits compatibles para su flujo de trabajo y proporcionarle los números de catálogo exactos de Thermo Fisher que necesita. Indíquenos el tipo de muestra, el tamaño del objetivo y el método de detección; encontraremos los productos adecuados y le proporcionaremos los plazos de entrega.