Agilent, GK80050, AdvanceBio β-N-acetilhexosaminidasa

β-N-acetilhexosaminidasa AdvanceBio. Esta enzima escinde toda la N-acetilglucosamina (GlcNAc) con enlaces β terminales no reductores. También conocida como N-acetil-β-D-glucosaminidasa, β-N-acetilglucosaminidasa. β(1-2,3,4,6)-específica. Úsela con GKX-5003 para determinar la posición de enlace de los residuos de GlcNAc con enlaces β. No libera la GlcNAc bisectante de los N-glicanos. No presenta actividad frente a la N-acetilgalactosamina (GalNAc). Incluye tampón de incubación A 5x [fosfato sódico 250 mM, pH 5,0].

Presupuesto:
Concentración: 40 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Debido a la compleja especificidad de esta enzima, se ha utilizado ampliamente para el análisis de la isomería posicional de la GlcNAc en glicanos. Es complementaria a la ß-N-acetilhexosaminidasa de la canavalia (GKX-5003).
Formulación enzimática: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl (pH 7,5)
Fuente de la enzima: Gen recombinante de Streptococcus pneumoniae, expresado en E. coli.
Especificidad enzimática: Esta enzima libera N-acetilglucosamina con enlaces ß(1-2,3,4 y 6) terminales no reductores a partir de carbohidratos complejos. Al incubarse con oligosacáridos a bajas concentraciones (menos de 50 mU/ml), la enzima puede diferenciar entre los enlaces GlcNAcß1-2Man, GlcNAcß1-4Man y GlcNAcß1-6Man. En estas condiciones, la enzima escinde únicamente la GlcNAc con enlaces ß1-2, con dos condiciones. En primer lugar, la ß1-2 GlcNAc no se hidroliza si la manosa a la que se sustituye presenta una sustitución en C-6. Por lo tanto, la enzima es útil para el análisis de oligosacáridos triantenarios. En segundo lugar, si la manosa ß-enlazada del núcleo del pentasacárido conservado se sustituye por una GlcNAc 'bisectante', solo se escinde la GlcNAc ß1-2 enlazada a la manosa en el brazo a1-3. A concentraciones más altas de la enzima, la GlcNAc ß(1-4) y ß(1-6)-enlazada también puede hidrolizarse. La actividad descrita contra oligosacáridos O-enlazados sugiere que la GlcNAc ß1-3Gal y la GlcNAc ß1-6Gal se digieren1. Aunque se desconoce la especificidad hacia oligosacáridos que contienen GalNAc, la enzima, al igual que otras glucosaminidasas, también hidroliza pNP-ß-GalNAc a pH 6,0 y 37 °C. La actividad hacia este sustrato es aproximadamente 7 veces menor que hacia pNP-ßGlcNAc.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de 1 µmol de p-nitrofenol a partir de p-nitrofenol-N-acetil-ß-D-glucosaminida por minuto a 37 °C, pH 5,0.
Volumen: 40 µL
pH óptimo: 5

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La β-N-acetilhexosaminidasa de AdvanceBio es una enzima recombinante altamente purificada, ideal para el análisis preciso de glicanos en procesos de investigación biofarmacéutica y académica. Diseñada específicamente para la eliminación selectiva de residuos terminales de N-acetilglucosamina y N-acetilgalactosamina, esta enzima facilita la caracterización completa de N- y O-glicanos de diversas biomoléculas, incluyendo anticuerpos monoclonales y glicoproteínas. Su robusta actividad garantiza una desglicosilación eficiente en condiciones de reacción suaves, preservando las estructuras sensibles de los glicanos para un análisis posterior preciso.

Este producto es compatible con una amplia gama de plataformas analíticas, como columnas LC Agilent AdvanceBio, HPLC y sistemas de espectrometría de masas, lo que facilita una integración perfecta en protocolos de glicoperfilado establecidos. Sus principales aplicaciones incluyen el desarrollo de bioprocesos, las pruebas de control de calidad y la elucidación estructural detallada en la investigación glicomica y proteómica. Es muy recomendable para laboratorios que necesitan una eliminación de glicanos reproducible y de alta especificidad para respaldar las solicitudes regulatorias o la I+D avanzada.

La β-N-acetilhexosaminidasa AdvanceBio ofrece un rendimiento fiable, consistencia entre lotes y es ideal tanto para aplicaciones analíticas rutinarias como avanzadas. Para optimizar la preparación de muestras y los resultados analíticos, combínela con productos complementarios, como los kits de etiquetado de glicanos de Agilent y las soluciones de preparación de muestras AdvanceBio.