Agilent, GKE-5003, PNGasa F, Chryseobacterium, nativa

PNGasa F, Chryseobacterium, nativa. PNGasa F nativa, péptido-N-glicosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa. Libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. También disponible como producto recombinante, AdvanceBio N-glicanosa (véase GKE-5006A). Incluye tampón de reacción 5x, solución de desnaturalización y solución de detergente.

Presupuesto:
Aplicación: Análisis estructural de O-glicano
Concentración: ≥2 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: PNGaseF se utiliza para liberar glicanos N-ligados intactos de glicopéptidos y glicoproteínas. Preparación de proteínas desglicosiladas para estimación de peso molecular o estudios cristalográficos. Estudios de estructura y función de glicoproteínas N-glicosiladas.
Formulación enzimática: 52 mM Tris-HCl, 36 mM NaCl, 9 mM acetato de sodio, 5 mM EDTA, 0,02 % azida de sodio (pH 7,5), formulación sin glicerol
Fuente de la enzima: Nativa, purificada de Elizabethkingia meningoseptica. El organismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum.
Especificidad enzimática: La PNGasa F libera oligosacáridos intactos ligados a N de las glicoproteínas y los glicopéptidos. La enzima no escinde oligosacáridos de un solo residuo de asparagina, y la escisión no se produce si existe fucosa con enlaces α1-3 en el núcleo, como es común en las glicoproteínas vegetales. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión.
Definición de unidad enzimática: Una unidad de N-glicanasa se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 μmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a pH 7,5 y 37 °C.
Unidad: 100 mU
Volumen: 50 µL
pH óptimo: 7,5

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Esta enzima nativa, derivada de la especie Chryseobacterium, escinde eficazmente los oligosacáridos N-ligados de las glicoproteínas, lo que la hace indispensable para el análisis detallado de glicanos en la investigación biofarmacéutica y académica. El producto permite la desglicosilación completa de diversas glicoproteínas sin necesidad de condiciones desnaturalizantes, preservando la estructura y la actividad proteica para aplicaciones sensibles.

Ideal para el mapeo y perfilado de sitios de N-glicosilación, esta enzima optimiza los flujos de trabajo en glicoproteómica, desarrollo de biosimilares y pruebas de control de calidad. Su amplia especificidad de sustrato permite la incorporación de una amplia gama de tipos de glicoproteínas, incluyendo anticuerpos, hormonas y proteínas de superficie celular.

Diseñado para una integración perfecta con las principales plataformas analíticas, como los sistemas HPLC, LC-MS y CE de Agilent, garantiza resultados robustos y reproducibles. La enzima también es compatible con kits de preparación de muestras de glicómica y productos químicos de marcaje relacionados, lo que aumenta la flexibilidad en diversas configuraciones experimentales.

Cada lote se somete a rigurosas pruebas de actividad y pureza, lo que garantiza la consistencia y la fiabilidad, vitales tanto para el cribado de alto rendimiento como para estudios complejos de glicanos estructurales. Con este reactivo, los investigadores pueden lograr una caracterización precisa de los patrones de glicosilación, lo que impulsa los avances en el desarrollo de proteínas terapéuticas y el descubrimiento de biomarcadores de diagnóstico.