Agilent, GKE-5006B-1, AdvanceBio N-glicanasa (PNGasa F), ≥2,5 U/ml

AdvanceBio N-glicanasa (PNGasa F), ≥2,5 U/mL. Una forma recombinante de PNGasa F, libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. Se suministra en 5 viales de 200 mU de GKE-5006B. Incluye tampón de reacción de N-glicanasa 5x, solución de desnaturalización, solución de detergente y tampón de reacción Tris de N-glicanasa 5x (aplicaciones de MS). Se suministra a una concentración ≥2,5 U/mL. Para una formulación más concentrada de ≥10 U/mL, que puede ser útil para digestores nativos, consulte GKE-5010B o GKE-5020B (sin EDTA).

Presupuesto:
Concentración: ≥2,5 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Preparación de proteínas desglicosiladas para estimación de peso molecular o estudios cristalográficos. Liberación de glicanos N-ligados intactos de glicopéptidos y glicoproteínas. Estudios de estructura y función de glicoproteínas N-glicosiladas.
Formulación enzimática: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA (pH 7,5)
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glicosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Actividad específica de la enzima: ≥10 unidades/mg
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan el núcleo α(1-3) fucosilado, como en los glicanos vegetales y algunos glicanos de insectos. La asparagina debe estar unida mediante enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Este producto no contiene Endo F.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 μmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a 37 °C, pH 7,5.
Peso molecular: ~35.000 daltons
Unidad: 1000 mU
Volumen: 80 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glicanasa es una enzima PNGasa F recombinante de alta pureza diseñada para la desglicosilación eficaz de N-glicanos de las glicoproteínas antes del análisis posterior. Con una actividad de al menos 2,5 unidades por mililitro, esta enzima garantiza la liberación eficiente de N-glicanos, lo que facilita la elaboración precisa de perfiles y la caracterización estructural en la investigación biofarmacéutica y el control de calidad.

El producto está optimizado para su uso con muestras de glicoproteínas nativas o desnaturalizadas y se integra a la perfección en los flujos de trabajo de análisis de glicanos establecidos. Sus aplicaciones típicas incluyen la preparación de muestras para HPLC, LC-MS, MALDI-MS y electroforesis capilar para facilitar el mapeo de glicanos, la comprobación de la consistencia entre lotes y los estudios de biosimilitud de proteínas terapéuticas, como los anticuerpos monoclonales. AdvanceBio N-Glicanasa demuestra un rendimiento robusto en condiciones de tampón variables y puede combinarse con los kits de mapeo de glicanos AdvanceBio, las columnas y los consumibles de preparación de muestras pertinentes de Agilent para garantizar resultados de alta calidad.

Esta enzima es compatible con la instrumentación de laboratorio habitual, incluyendo sistemas Agilent y otros diseñados para el análisis cromatográfico y espectrométrico de masas de glicanos. Cada lote se somete a controles de calidad para garantizar su especificidad y actividad, lo que la convierte en un reactivo esencial para investigadores dedicados a la caracterización de glicoproteínas y el desarrollo biofarmacéutico.