Agilent, GKE-5010B, AdvanceBio N-Glicanasa-plus (PNGasa F), ≥10 U/mL

AdvanceBio N-Glicanasa-plus (PNGasa F), ≥10 U/mL. La enzima libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. Una forma recombinante de PNGasa F. Incluye tampón de reacción de N-glicanasa 5x: fosfato sódico 100 mM, pH 7,5, azida sódica al 0,1 %; solución de desnaturalización: SDS al 2 %, 2-mercaptoetanol 1 M; solución de detergente: detergente al 15 %; tampón de reacción Tris de N-glicanasa 5x: Tris-HCl 50 mM, pH 8,0.

Presupuesto:
Concentración: 10 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Para lograr una desglicosilación eficiente de sustratos de glicoproteínas en condiciones no desnaturalizantes, es necesario utilizar una mayor concentración inicial de enzima. N-Glicanasa-plus y ULTRA (libre de EDTA) se suministran a 10 U/ml y se recomiendan para todas las aplicaciones que requieren la desglicosilación de glicoproteínas en ausencia de desnaturalizantes. Su alta actividad también permite explorar volúmenes y tiempos de reacción más cortos.
Formulación enzimática: 20 mM Tris HCl pH 7,5, que contiene 1 mM EDTA y 50 mM NaCl
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glicosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Actividad específica de la enzima: ≥10 unidades/mg
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan un núcleo fucosilado (1-3), como en los glicanos vegetales. La asparagina debe estar unida mediante enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Libre de Endo F. Altamente concentrado, útil para la desglicosilación en condiciones nativas.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 µmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a pH 7,5 y 37 °C.
Unidad: 400 mU
Volumen: 40 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glycanase-plus (PNGase F) ofrece una liberación enzimática eficiente y fiable de glicanos ligados a N de las glicoproteínas, optimizando así los flujos de trabajo en el análisis de glicanos. Suministrada en una concentración mínima de 10 unidades por mililitro, esta enzima recombinante escinde rápidamente casi todos los tipos de oligosacáridos complejos, híbridos y ricos en manosa ligados a asparagina. El producto es ideal para la caracterización detallada de glicoproteínas en la investigación biofarmacéutica, incluyendo el análisis de anticuerpos monoclonales, la elaboración de perfiles de proteínas terapéuticas y las evaluaciones de control de calidad.

Los investigadores se benefician de su compatibilidad con diversos protocolos de preparación de muestras, tanto de desglicosilación en gel como en solución, lo que mejora el rendimiento y la reproducibilidad. Se integra a la perfección con las soluciones integrales de análisis de glicanos de Agilent, como las columnas AdvanceBio Glycan Mapping y los sistemas LC 1290 Infinity. La robusta actividad de la enzima también es compatible con aplicaciones posteriores, como la detección de glicanos por HILIC, fluorescencia o espectrometría de masas.

Diseñada para brindar precisión y consistencia, esta enzima es ideal para laboratorios que trabajan en el desarrollo de fármacos, la evaluación de biosimilares o la elucidación de patrones de glicosilación. Su formato intuitivo ayuda a reducir el tiempo de trabajo y facilita la obtención de datos reproducibles de alta calidad, lo que contribuye al cumplimiento de los requisitos regulatorios y al avance del descubrimiento biológico.