BD, 551454, BD Pharmingen™ Anti-C1qRp humano purificado de ratón (CD93)

Nombre alternativo: C1qRp
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgM de ratón, κ
Inmunógeno: proteína de unión a C1q
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente), inmunoprecipitación, Western blot (reportado)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_394201
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: La técnica de tinción y los controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Se recomienda un control de isotipo κ de IgM de ratón adecuado (n.º de cat. 555581) para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas: utilizar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg Ab/1 millón de células) (véase la figura). Para conocer la metodología específica, visite la sección de protocolos en "Citometría de flujo multicolor" en http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Western blot e inmunoprecipitación: Cuando se procesa en condiciones no reductoras, el CD93 humano migra como una proteína de 100 kDa; debido al alto nivel de glicosilación, el CD93 migra como 126 kDa en condiciones reductoras. El anticuerpo R3 es adecuado para detectar CD93 mediante Western blot e inmunoprecipitación, como se describe; sin embargo, no se ha probado para esta aplicación en BD Biosciences Pharmingen. Su reactividad con la proteína reducida disminuye drásticamente. Modulación de la actividad fagocítica de los monocitos: El pretratamiento de monocitos con R3 neutraliza la intensificación de la fagocitosis mediada por CD93. Además, al inmovilizarse, R3 imita la intensificación de la fagocitosis mediada por CD93, MBL o SPA; sin embargo, no se ha probado para esta aplicación en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Avisos del producto. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La azida sódica es un inhibidor reversible del metabolismo oxidativo; por lo tanto, las preparaciones de anticuerpos que contienen este agente conservante no deben utilizarse en cultivos celulares ni inyectarse en animales. La azida sódica puede eliminarse lavando las células teñidas o el anticuerpo unido a la placa, o dializando el anticuerpo soluble en un tampón sin azida sódica. Dado que la endotoxina también puede afectar los resultados de los estudios funcionales, recomendamos el formato de anticuerpo NA/LE (sin azida/bajo endotoxina), si está disponible, para uso in vitro e in vivo. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.