BD, 554400, BD Pharmingen™ Anti-IL-6 de rata purificada

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: proteína recombinante IL-6 de ratón
Aplicación: Captura ELISA (probada rutinariamente), citometría de flujo/bloqueo intracelular, neutralización (probada durante el desarrollo), Western blot (reportado)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_398549
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Conservar sin diluir a 4 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Captura ELISA: El anticuerpo MP5-20F3 purificado (Cat. No. 554400) es útil como anticuerpo de captura para un ELISA sándwich para medir los niveles de proteína IL-6 de ratón. El anticuerpo MP5-20F3 purificado se puede emparejar con el anticuerpo MP5-32C11 biotinilado (Cat. No. 554402) como anticuerpo de detección, con IL-6 de ratón recombinante (Cat. No. 554582) como estándar. El anticuerpo MP5-20F3 purificado se debe titular de 2 a 6 µg/ml para determinar la concentración óptima para la captura ELISA. Para obtener curvas estándar lineales, se recomiendan diluciones dobles de IL-6 de ratón que oscilan entre ~2000 y 15 pg/ml para su inclusión en cada placa ELISA. Para conocer la metodología específica, visite las secciones de protocolos o el capítulo sobre ELISA en el Manual de Función Inmunitaria, ambos publicados en nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com. Nota: Este par de reactivos ELISA se recomienda principalmente para la medición de citocinas en cultivos celulares experimentales. Estos reactivos ELISA no se recomiendan para analizar muestras de suero o plasma. Para la medición de IL-6 de ratón en suero o plasma, nuestro set BD OptEIA™ para IL-6 de ratón (n.º de cat. 555240) o el kit BD OptEIA™ (n.º de cat. 550950) están específicamente formulados y se recomiendan. Control de bloqueo para tinción intracelular: El anticuerpo MP5-20F3 purificado (n.º de cat. 554400) puede utilizarse como control de bloqueo para demostrar la especificidad de la tinción de IL-6 mediante el anticuerpo MP5-20F3 conjugado con PE (n.º de cat. 554401). Para realizar este control, las células fijadas/permeabilizadas (~1 millón) pueden incubarse con 1-10 µg de anticuerpo MP5-20F3 purificado (n.º de cat. 554400) durante 20 minutos a 4 °C, antes de teñirlas con el anticuerpo PE-MP5-20F3 (p. ej., 0,1-0,5 µg de mAb/1 millón de células). La técnica de tinción intracelular de citocinas y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Para obtener información sobre la metodología específica, visite la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de Función Inmunitaria, ambos publicados en nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com. Neutralización: El anticuerpo BD NA/LE™ MP5-20F3 (n.º de cat. 554398) es útil para neutralizar la bioactividad de la IL-6 de ratón. Un control adecuado de isotipo coincidente de IgG1 de rata BD NA/LE™ es el anticuerpo R3-34 (n.° de cat. 554682). Western blot: Se ha descrito la utilidad del anticuerpo MP5-20F3 para el Western blot. Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.