BD, 554420, BD Pharmingen™ APC Rata Anti-TNF de Ratón

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: TNF de ratón recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_398553
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con APC en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la APC libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y citometría de flujo: El anticuerpo MP6-XT22 conjugado con APC puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y los análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de TNF en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con el análisis de citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo MP6-XT22 conjugado con un ligando (p. ej., TNF murino recombinante; n.º de cat. 554589) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo MP6-XT22 no marcado (n.º de cat. 554416) antes de la tinción. La técnica de tinción y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es el APC-R3-34 (n.º de cat. 554686). Los controles de isotipo deben utilizarse a una concentración comparable a la del anticuerpo de interés. Captura ELISA: El anticuerpo MP6-XT22 purificado (n.° de cat. 554416) es útil como anticuerpo de captura para un ELISA tipo sándwich para medir los niveles de proteína TNF en ratones. WB: Se ha informado de la utilidad del anticuerpo MP6-XT22 para la inmunotransferencia (Western blotting). Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.