BD, 554576, BD Pharmingen™ APC Anti-IL-12 humana de ratón (p40/p70)

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de ratón
Inmunógeno: heterodímero p70 de IL-12 humana recombinante expresado en CHO
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_398574
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con APC en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la APC libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo C11.5 conjugado con APC puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y los análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-12 p40/p70 en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con el análisis por citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, consulte la sección de protocolos en línea o el capítulo sobre tinción inmunofluorescente del Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Un control isotípico de IgG1 murino adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es la inmunoglobulina APC-MOPC-21 (n.° de cat. 554681); úsela en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 millón de células). Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo C11.5 conjugado con fluorocromo con un exceso de ligando (p. ej., IL-12 p70 humana recombinante, n.° de cat. 554613 o IL-12 p40 humana recombinante, n.° de cat. 554633) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo C11.5 sin marcar (n.° de cat. 554573) antes de la tinción. Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y vaya a la sección de protocolos o al capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de función inmunitaria.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Ficoll-Paque es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited.