BD, 554702, BD Pharmingen™ APC Anti-IFN-γ humano de ratón

Nombre alternativo: IFNG; Interferón gamma; Interferón-γ; interferón tipo II; MAF
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: proteína recombinante IFN-γ humana
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_398580
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene estabilizador de proteínas y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con APC en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la APC libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo B27 conjugado con APC (n.° de cat. 554702) es útil para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ en poblaciones celulares mixtas (véase la imagen). Para una tinción inmunofluorescente óptima para el análisis por citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/1 x 10^6 células). Para consultar la metodología específica, visite la sección de protocolos en "Flujo intracelular" de nuestro sitio web: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es el siguiente: prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo B27 sin marcar (n.º de cat. 554699/550011) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular de citocinas y los controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es el APC-MOPC-21 (n.º de cat. 554681); utilizar en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 x 10^6 células). Neutralización: El anticuerpo NA/LE™ B27 (n.º de cat. 554698) es útil para neutralizar la bioactividad del IFN-γ humano. Un control de isotipo de IgG1 de ratón NA/LE adecuado para el anticuerpo NA/LE B27 es el anticuerpo 107.3 (n.° de cat. 554698). IP/WB: Se ha informado que el anticuerpo B27 es útil para estudios de inmunoprecipitación. Se ha informado que el anticuerpo B27 no se une al IFN-γ desnaturalizado. Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria.
Avisos del producto: Avisos del producto. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Este reactivo conjugado con APC se puede utilizar en cualquier citómetro de flujo equipado con un láser de colorante, HeNe o diodo rojo. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Es posible que la reactividad cruzada entre especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.