BD, 558000, BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 700 Rata anti-TNF de ratón

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: TNF de ratón recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_396980
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene estabilizador de proteínas y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con Alexa Fluor® 700 en condiciones óptimas y se eliminó el Alexa Fluor® 700 no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y citometría de flujo: El anticuerpo MP6-XT22 conjugado con Alexa Fluor® 700 puede utilizarse para la tinción inmunofluorescente multicolor y los análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar las células productoras de TNF en poblaciones celulares mixtas (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con el análisis de citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo MP6-XT22 conjugado con ligando (p. ej., TNF murino recombinante; n.º de cat. 554589) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo MP6-XT22 no marcado (n.º de cat. 554416) antes de la tinción. La técnica de tinción y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es el control de isotipo de IgG1 κ de rata Alexa Fluor® 700 (n.º de cat. 558001); utilizar en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés.
Avisos del producto: Avisos del producto. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Alexa Fluor® 700 tiene una adsorción máxima de ~700 nm y una emisión de fluorescencia máxima de ~720 nm. Antes de teñir las células con este reactivo, confirme que su citómetro de flujo sea capaz de excitar el fluorocromo y discriminar la fluorescencia resultante. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Los conjugados de anticuerpos Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® presentes en este producto se comercializan bajo licencia de Molecular Probes, Inc. exclusivamente para uso en investigación, excluyendo su uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos para analitos. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), Pacific Blue™ y Cascade Blue® están protegidos por patentes en trámite y concedidas. El uso de estos productos para medir antígenos de activación expresados ​​en subconjuntos de células mononucleares con el fin de monitorizar el estado inmunorregulador puede estar amparado por una o más reivindicaciones de las siguientes patentes: Patentes estadounidenses n.º 5.445.939, 5.656.446 y 5.843.689; Patente europea n.º 319.543; Patente canadiense n.º 1.296.622; Patente australiana n.º 615.880; y Patente japonesa n.º 2.769.156. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR.