BD, 560116, BD Phosflow™ PE-Cy™7 Anti-ERK1/2 de ratón (pT202/pY204)

Nombre alternativo: p44/42 MAPK; Quinasa 1/2 regulada por señales extracelulares (pT202/Y204)
Reactividad: Humana (prueba de control de calidad), Humano, Ratón, Rata (Reactividad confirmada en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón
Inmunógeno: péptido fosforilado de ERK1 de rata (T202/Y204)
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_1645296
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy7 en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy7 libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Este conjugado de anticuerpos es adecuado para la tinción intracelular de sangre humana completa (utilizando el tampón de lisina/fijación BD Phosflow™) y células mononucleares de sangre periférica (utilizando el tampón de fijación BD Cytofix™ o el tampón de fijación BD Phosflow™ I). Se puede utilizar cualquiera de los tres tampones de permeabilización BD Phosflow™. Este mAb se caracterizó por citometría de flujo (Flow) y análisis de transferencia Western (WB) utilizando estos sistemas modelo: Método Especie Células Tratamiento Fijación Tampón de permeación Resultado Flujo PBMC humanas Tampón de fijación de PMA I, II o III Tinción positiva Flujo Sangre humana completa PMA Lisina/fijación I, II o III Tinción positiva WB Lisado celular humano A431 EGF No aplicable No aplicable 44/42 kDa
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). PE-Cy7 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con luz de 488 nm y sirve como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy7, que actúa como aceptor de energía y fluoresce máximamente a 780 nm. La emisión del fluorocromo en tándem PE-Cy7 se recoge en un detector para longitudes de onda de fluorescencia de 750 nm y superiores. Aunque se hace todo lo posible para minimizar la variación entre lotes en la eficiencia de la transferencia de energía del fluorocromo, se pueden observar diferencias en la emisión residual de PE. Por lo tanto, recomendamos que se realicen controles de compensación individuales para cada conjugado PE-Cy7. PE-Cy7 está optimizado para su uso con un único láser de iones de argón que emite luz de 488 nm, y no existe una superposición significativa entre los espectros de emisión de PE-Cy7 y FITC. Al utilizar citómetros de doble láser, que pueden excitar directamente tanto PE como Cy7, recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes estadounidenses n.° 5.486.616; 5.569.587; 5.569.766; 5.627.027. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta únicamente para investigación. No tiene licencia para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material sin abrir a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121 y se le reembolsará el dinero pagado por el material. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a la iluminación ambiental. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Para consultar los protocolos técnicos, visite www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Advertencia: Algunos conjugados APC-Cy7 y PE-Cy7 muestran cambios en su espectro de emisión con la exposición prolongada al formaldehído. Si no puede analizar las muestras fijadas en un plazo de cuatro horas, le recomendamos utilizar el fijador estabilizador BD™ (n.° de cat. 338036).