BD, 560802, BD Pharmingen™ Cóctel de isotipos de Ig fluorescente de tres colores con CD4+ humano PerCP-Cy™5.5

Reactividad: Humana (Reportada)
Aplicación: Citometría de flujo (probada durante el desarrollo)
Estado regulatorio: RUO
ID de registro: AB_2034027
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Descripción: Este cóctel multicolor contiene una mezcla de anticuerpo anti-CD4 humano PerCP-Cy5.5 (clon SK3) y controles de isotipo FITC-IgG1, κ de ratón (MOPC-21), PE-IgG1, κ de ratón (MOPC-21) y APC-IgG1, κ de rata (R3-34). Este cóctel de control de isotipo de Ig fluorescente sirve como control negativo para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo con el kit de fenotipado BD Human Th1/Th2/Th17 (componente 51-9006615 del n.º de cat. 560751). Este cóctel de fenotipado se compone de anticuerpos PerCP-Cy5.5 anti-CD4 humano, FITC-IgG1 de ratón, κ anti-IFN-γ humano, APC-IgG1 de rata, κ anti-IL-4 humana, y PE-IgG1 de ratón, κ anti-IL-17 humana. El kit de fenotipado BD Human Th1/Th2/Th17 proporciona un cóctel de cuatro colores fácil de usar de anticuerpos fluorescentes específicos para CD4 humano, IFN-γ (para Th1), IL-4 (para Th2) e IL-17A (para Th17). Este kit permite a los investigadores identificar y caracterizar la naturaleza de los tipos de linfocitos T cooperadores mediante tinción inmunofluorescente multicolor y análisis por citometría de flujo.
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PerCP-Cy5.5 en condiciones óptimas, eliminándose tanto el anticuerpo no conjugado como el PerCP-Cy5.5 libre. No se recomienda almacenar los conjugados de PerCP-Cy5.5 en un diluyente no optimizado, ya que puede provocar una pérdida de intensidad de la señal. El anticuerpo se conjugó con el colorante en condiciones óptimas, eliminándose tanto el anticuerpo no conjugado como el colorante libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: El cóctel de control de isotipo de Ig multicolor está diseñado para controlar la tinción inespecífica por anticuerpos fluorescentes dirigidos contra antígenos celulares encontrados en células T CD4+ diana que se han fijado con BD Cytofix™ Fixation Buffer (Cat. No. 554655) y permeabilizado con BD Perm/Wash™ Buffer (Cat. No. 554723), o el BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Solution Kit (Cat. No. 554714). La tinción inespecífica por anticuerpos fluorescentes puede deberse a la inmunoglobulina inespecífica y/o la unión mediada por fluorocromos a moléculas celulares, incluyendo receptores Fc para inmunoglobulina. Además, este cóctel de isotipos de Ig multicolor puede utilizarse como control negativo para la tinción de otros cócteles de anticuerpos fluorescentes multicolor que contienen PerCP-Cy™5.5 anti-CD4 humano mezclado con anticuerpos IgG1κ de ratón conjugados con FITC y PE e IgG1κ de rata APC. Por lo tanto, este cóctel puede proporcionar controles negativos para la tinción inmunofluorescente con anticuerpos fluorescentes específicos para otros marcadores intracelulares (p. ej., citocinas, quimiocinas o factores de transcripción) expresados ​​por linfocitos T CD4+, preparados con el tampón de fijación BD Cytofix™ y el tampón de permeabilización/lavado BD Perm/Wash™. Consulte el protocolo para la estimulación, fijación, permeabilización y tinción celular en la ficha técnica del kit de fenotipado de Th1/Th2/Th17 humano (n.º de cat. 560751). Las BD® CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la compensación de la fluorescencia. Cuando los anticuerpos conjugados con fluorocromos se unen a las BD® CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos, pueden existir pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de derrame que difieren de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, los usuarios comparen el derrame en las células y en las BD® CompBeads para asegurarse de que estas sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Este reactivo conjugado con APC se puede usar en cualquier citómetro de flujo equipado con un láser de colorante, HeNe o diodo rojo. Observe las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a la iluminación ambiental. Para conocer los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada de los instrumentos, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Los anticuerpos marcados con PerCP-Cy5.5 pueden utilizarse con reactivos marcados con FITC y R-PE en citómetros de flujo de láser único, sin superposición espectral significativa de la fluorescencia de PerCP-Cy5.5, FITC y R-PE. PerCP-Cy5.5 está optimizado para su uso con un láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros de láser dual, ya que pueden excitar directamente tanto PerCP como Cy5.5™. Recomendamos el uso de compensación de haz cruzado durante la adquisición de datos o compensación de software durante el análisis de datos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Cy es una marca registrada de Global Life Sciences Solutions Germany GmbH o de una filial que opera bajo el nombre comercial de Cytiva.
Descripción: Clon: Isotipo: ID de EntrezGene
N/A: N/A: | IgG1, κ, IgG1, κ, IgG1, κ, IgG1, κ: N/A