BD, 561825, BD Pharmingen™ PE-Cy™5 Antirratón CD3e para hámster

Nombre alternativo: CD3; CD3 épsilon; Cd3e; CD3ε; T3e
Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: Hámster Armenio IgG1, κ
Inmunógeno: clon de linfocito T citotóxico específico H-2Kb BM10-37
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_10896325
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con el colorante en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y el colorante libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Precauciones para citometría de flujo: Se ha informado que los fluorocromos en tándem PE-Cy™5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y se ha informado que PE se une a linfocitos B de ratón a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos de ratón con Mouse BD Fc Block™ (mAb 2.4 G2 anti-CD16/CD32 de ratón purificado) puede reducir la unión no específica de los reactivos conjugados con PE-Cy™5 a las células B de ratón. Sin embargo, los reactivos conjugados con PE-Cy™5 no deben usarse para teñir esplenocitos de ratones SJL, NOD o MRL, ya que se ha informado que los linfocitos B u otros leucocitos se tiñen de forma no específica independientemente del uso de Mouse BD Fc Block™. Los reactivos conjugados con los fluorocromos en tándem PE, PerCP, PerCP-Cy™5.5, APC y APC-Cy™7 pueden utilizarse alternativamente en leucocitos de estas cepas de ratón. Las BD® CompBeads pueden utilizarse como sustitutos para evaluar la dispersión de fluorescencia (compensación). Cuando los anticuerpos conjugados con fluorocromos se unen a las BD® CompBeads, presentan propiedades espectrales muy similares a las de las células. Sin embargo, para algunos fluorocromos puede haber pequeñas diferencias en las emisiones espectrales en comparación con las células, lo que resulta en valores de dispersión que difieren de los controles biológicos. Se recomienda encarecidamente que, al utilizar un reactivo por primera vez, se compare la dispersión en las células y en las BD CompBeads para asegurarse de que estas sean adecuadas para su aplicación celular específica.
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Aunque los isotipos de inmunoglobulina de hámster no están bien definidos, BD Biosciences Pharmingen ha agrupado los anticuerpos monoclonales IgG de hámster armenio y sirio según su reactividad con un panel de mAb IgG anti-hámster de ratón. Puede consultar una tabla de los grupos de IgG de hámster, Reactividad de mAb Ig anti-hámster de ratón, en http://www.bdbiosciences.com/documents/hamster_chart_11x17.pdf. PE-Cy5 está optimizado para su uso con un solo láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem PE-Cy5, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros de láser dual que pueden excitar directamente tanto PE como Cy5™. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada de los instrumentos, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la luz ambiental. PE-Cy5 es un fluorocromo en tándem compuesto por R-ficoeritrina (PE), que se excita con la luz de 488 nm de un láser de iones de argón y actúa como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy5, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 670 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en PE-Cy5, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de PE y la variación entre lotes. Se ha descrito que los fluorocromos en tándem PE-Cy5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y que PE se une a linfocitos B de ratón a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos de ratón con el anticuerpo monoclonal anti-CD16/CD32 de ratón purificado Mouse BD Fc Block™ 2.4G2 puede reducir la unión inespecífica de los reactivos conjugados con PE-Cy5 a los linfocitos B de ratón. Sin embargo, no se deben utilizar reactivos conjugados con PE-Cy5 para teñir esplenocitos de ratones SJL, NOD y MRL, ya que se ha descrito que los linfocitos B y otros leucocitos presentan una tinción inespecífica independientemente del uso de Mouse BD Fc Block™ (el complejo CD72c se ha relacionado con la unión de PE-Cy5 en estas cepas). Los reactivos conjugados con los fluorocromos en tándem PE, PerCP, PerCP-Cy5.5, APC y APC-Cy7 se pueden utilizar en leucocitos de estas cepas de ratón. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Cy es una marca registrada de Global Life Sciences Solutions Germany GmbH o de una filial que opera bajo el nombre comercial de Cytiva.