BD, 552035, BD Pharmingen™ FUT-175 (Futhan)

Preparación y almacenamiento: Conservar el estándar liofilizado a 4 °C antes de su reconstitución. Proteger de la luz y la humedad. Tras su reconstitución con dH₂O, Futhan es estable durante 4 semanas si se conserva a 4 °C y varios meses si se conserva a -80 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados La activación del complemento in vivo puede iniciar, contribuir a o exacerbar las reacciones inflamatorias observadas en la sepsis bacteriana gramnegativa, trauma, SDRA, cardiopatía isquémica, síndrome posdiálisis y varias enfermedades autoinmunes, incluyendo artritis reumatoide, lupus eritematoso y glomerulonefritis aguda. Aunque la quelación de cationes bivalentes por EDTA previene la activación de varias proteasas plasmáticas, incluyendo las vías de coagulación y complemento, se ha informado que todavía ocurre la escisión de ciertos componentes del complemento. Esto hace que las mediciones in vitro de los productos de escisión generados in vivo, como C3a, C4a o C5a, sean menos precisas. La adición de FUT-175 (Futhan) a las muestras de plasma en el momento de la recolección de la muestra proporciona protección adicional contra la activación ex vivo y, por lo tanto, asegura mediciones más precisas que reflejan los niveles circulantes de productos de activación del complemento. Toma de muestras para la determinación de anafilatoxina: Antes de usar, reconstituya FUT-175 (Futhan) con 1 ml de dH₂O para obtener una solución madre 100x. Evite usar PBS u otros tampones que contengan fosfato, ya que podrían reducir la solubilidad de FUT-175. Añada 10 µl de solución madre de FUT-175 (Futhan) por ml de sangre con EDTA recién extraída (es decir, 100 µl de solución madre de FUT-175 (Futhan)/10 ml de sangre con EDTA). Conserve la muestra de sangre en hielo, centrifugue y recoja el plasma. Realice las mediciones de C3a-desArg, C4a-desArg o C5a-desArg con nuestros kits OptEIA (n.° de cat. 550499, 550947 o 550500), o con nuestros anticuerpos de complemento murino para ELISA (558250, 558251, 558618, 558027, 558028, 622597), o bien conserve las muestras a 4 °C o congélelas a -80 °C para su posterior evaluación. Como alternativa, FUT-175 (Futhan) puede actuar como estabilizador de muestras al añadirse a 10 µl/ml de muestras de plasma o suero. Nuestros estudios muestran que la generación ex vivo de C4a-desArg en muestras de plasma con EDTA se bloquea hasta 24 horas a 4 °C o a temperatura ambiente, y hasta 5 horas a 37 °C, en presencia de la concentración recomendada de FUT-175 (Futhan) (es decir, 50 µg/ml).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.