BD, 560123, BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 555 Antigeno TRA-1-81 humano de ratón

Reactividad: Humana (Prueba de control de calidad), Rh (Reportada)
Isotipo: IgM BALB/c de ratón, κ
Inmunógeno: Línea celular de carcinoma embrionario humano
Aplicación: Bioimagen (Probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 5 µl
ID de registro: AB_1645392
Tampón de almacenamiento: solución tamponada acuosa que contiene BSA, estabilizador de proteínas y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con Alexa Fluor® 555 en condiciones óptimas y se eliminó el Alexa Fluor® 555 que no reaccionó.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Procedimiento de ensayo recomendado: 1. Siembre las células en un medio de cultivo apropiado a una densidad celular apropiada en una placa de imágenes BD Falcon™ de 96 pocillos (n.º de cat. 353219) y cultive durante la noche a 48 horas. 2. Retire el medio de cultivo de los pocillos, lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1× y fije las células añadiendo 100 µl de formaldehído fresco al 3,7 % en PBS o tampón de fijación BD Cytofix™ (n.º de cat. 554655) a cada pocillo e incubándolo durante 10 minutos a temperatura ambiente (TA). 3. Retire el fijador de los pocillos y lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1×. 4. Diluya el anticuerpo en PBS 1× y tiña las células añadiendo 50 µl del conjugado de anticuerpo diluido a cada pocillo e incubándolo durante 1 hora a temperatura ambiente. 5. Retire el anticuerpo diluido y lave los pocillos dos veces con 100 µl de PBS 1×. 6. Retire el PBS y contratine los núcleos añadiendo 100 µl de una solución de 2 µg/ml de Hoechst 33342 (p. ej., Sigma-Aldrich Cat. N.º B2261) en PBS 1× a cada pocillo al menos 15 minutos antes de la adquisición de la imagen. 7. Observe y analice las células en un instrumento de adquisición de imagen adecuado.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Este reactivo ha sido prediluido para su uso en el volumen recomendado por prueba cuando se sigue el procedimiento de ensayo recomendado. Una prueba suele ser de ~10 000 células cultivadas en un pocillo de una placa de imágenes de 96 pocillos. Alexa Fluor® es una marca registrada de Molecular Probes, Inc., Eugene, OR. Los conjugados de anticuerpos de los colorantes Alexa Fluor®, Pacific Blue™ y Cascade Blue® de este producto se venden bajo licencia de Molecular Probes, Inc. solo para uso en investigación, excluyendo el uso en combinación con microarrays o como reactivos específicos de analitos. Los colorantes Alexa Fluor® (excepto Alexa Fluor® 430), el colorante Pacific Blue™ y el colorante Cascade Blue® están cubiertos por patentes pendientes y emitidas. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos.