BD, 550068, BD Pharmingen™ GM-CSF humano recombinante

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, el GM-CSF humano recombinante (n.º de cat. 550068) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5-10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina sérica humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 0,5-1 mg/ml. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5-10 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede perderse la actividad. El producto no debe diluirse a menos de 5 μg/ml para el almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a la toxicidad, los altos niveles de endotoxina o la posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: El GM-CSF humano recombinante (Cat. No. 550068) puede ser útil como un estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína GM-CSF humano usando ELISA sándwich con el anticuerpo BVD2-23B6 purificado (Cat. No. 554502) como anticuerpo de captura y BVD2-21C11 biotinilado (Cat. No. 554505) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, los investigadores pueden considerar el uso de diluciones dobles de GM-CSF humano recombinante de 2,000 - 15 pg/mL para ser incluidas en cada placa ELISA. Para medir GM-CSF humano en suero o plasma, se recomienda encarecidamente a los investigadores utilizar el BD OptEIA™ Human GM-CSF ELISA Set (Cat. No. 555126). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de Bioensayo no se analiza rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente que titulen este material e incluyan controles apropiados en los experimentos relevantes. Se ha reportado previamente un rango de actividad de 0,1 a 1,0 x 10^9 unidades/mg, que abarca una DE50 de 10 a 90 pg/mL, utilizando TF-1 como células indicadoras de proliferación, definiéndose la unidad como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima a la saturación de citocinas. Bloqueo: El GM-CSF humano recombinante (n.° de cat. 550068) puede ser útil como control de bloqueo para el análisis de citometría de flujo cuando se utiliza con BVD2-21C11 conjugado con PE (n.° de cat. 554507). Se informa a los investigadores que la aplicación de bloqueo no se analiza rutinariamente para este material. C. Prussin y D. Metcalfe describen en detalle las técnicas de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.