BD, 550069, BD Pharmingen™ IL-2 recombinante de ratón

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, la IL-2 recombinante de ratón (n.º de cat. 550069) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 a 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina sérica humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 a 10 mg/ml. Para ensayos biológicos in vitro, se sugieren concentraciones de proteína transportadora de 1 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede producirse una pérdida de actividad. Este producto no debe diluirse a menos de 10 µg/ml para un almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a su toxicidad, altos niveles de endotoxinas o posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La IL-2 de ratón es útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína IL-2 de ratón en un ELISA sándwich específico para IL-2 con el anticuerpo purificado JES6-1A12 (n.° de cat. 554424) como anticuerpo de captura y el clon biotinilado JES6-5H4 (n.° de cat. 554426) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se deben incluir diluciones dobles del estándar de IL-2 de ratón de ~2000 a 15 pg/mL con cada placa ELISA. Este par de ELISA se recomienda principalmente para la medición de citocinas en sistemas de cultivo celular experimental, no para el análisis de muestras de suero o plasma. Para la medición de IL-2 en suero o plasma, el kit BD OptEIA™ para IL-2 de ratón (n.° de cat. 555148) está especialmente formulado y se recomienda. Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de Bioensayo no se prueba rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente que titulen este material e incluyan controles apropiados en los experimentos relevantes. Se ha reportado previamente un rango de actividad de 0.1 - 1.0 x 10^9 unidades/mg, que abarca una ED50 = 10 - 100 pg/mL, utilizando células indicadoras CTLL-2 para la proliferación, con una unidad definida como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima en la saturación de citocinas. Bloqueo: La IL-2 recombinante de ratón (Cat. No. 550069) puede ser útil como control de bloqueo para el análisis de citometría de flujo cuando se usa con anticuerpos conjugados con fluorocromos, como JES-5H4 conjugado con PE (Cat. No. 554428). Se informa a los investigadores que la aplicación de bloqueo no se prueba rutinariamente para este material. C. Prussin y D. Metcalfe describen en detalle las técnicas de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.